Question

13．从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．
（1）下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体
方法．获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法，获得图B效果的接种方法是平板划线法．在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现单个菌落，表明菌已分离．

（2）对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置．
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养 （成分见下表）：注：“+”表示有，“-”表示无，CR溶液（刚果红）．

	酵母膏	无机盐	淀粉	纤维素粉	琼脂	CR溶液	水
培养基甲	+	+	+	+	-	+	+
培养基乙	+	+	+	-	+	+	+

据图判断：
培养基甲不能（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是液体培养基不能用子分离单菌落；
培养基乙不能用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是培养基中没有纤维素，不会形成CR纤维素红色颜色复合物．
（4）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了自来水样品的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种等量无菌水作为对照进行实验．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法，获得图B效果的接种方法是平板划线法．在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现单个菌落，表明菌已分离．
（2）对培养基进行灭菌常用高压蒸汽灭菌法．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，防止皿盖上的水珠滴入培养基．
（3）培养基甲为液体培养基，液体培养基不能分离单菌落，所以培养基甲不能用于分离和鉴别纤维素分解菌；培养基乙没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌，因此培养基乙也不能用于分离和鉴别纤维素分解菌．
（4）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了自来水样品的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种等量无菌水作为对照进行实验．
故答案为：
（1）稀释涂布平板法    平板划线法     单个菌落      
（2）高压蒸汽灭菌    倒置
（3）不能     液体培养基不能用子分离单菌落     红色
（4）恒温培养箱    等量无菌水

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的组成成分、种类及功能；识记接种微生物常用的两种方法；识记无菌技术，能结合所学的知识准确答题．