Question

3．为解决塑料袋造成的“白色污染”这一问题，某同学试图从土壤中寻找一种能加速塑料袋自然降解过程的目的菌，以下是该同学从土壤中寻找并筛选目的菌的流程，请回答下列问题：

（1）对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法．在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，方法是将未接种的培养基在37℃（或适宜温度）恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成．
（2）Ⅰ号培养基属于选择（按功能分）培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”．如图采用的接种方法为稀释涂布平板法．Ⅱ号培养基从物理性质来看，不能（填“能”或“不能”）添加琼脂．
（3）该同学在稀释倍数为10⁴的培养基中测得平板上菌落数的平均值为20.4，则每毫升样品中的菌落数是1.02×10⁶个．（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL）

Answer 1

分析 1、无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌．
2、接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法：由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落．
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞．计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内．

解答 解：（1）培养基高压蒸汽灭菌法　进行灭菌．在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，可以将将未接种的培养基在37℃（或适宜温度）恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成．
（2）要筛选降解聚乙烯塑料的微生物，应选择以聚乙烯塑料为唯一碳源的选择培养基．图Ⅱ号培养基上采用的接种方法为稀释涂布平板法，从液体培养基到固体培养基需添加凝固剂琼脂．Ⅱ号培养基为固体培养基，不需要加琼脂．
（3）根据题意可知，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=20.4÷0.2×10⁴=1.02×10⁶．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌法　将未接种的培养基在37℃（或适宜温度）恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成
（2）选择　稀释涂布平板法　不能
（3）1.02×10⁶

点评 微生物这部分内容是高考试题的一个热点一般体现在对生物工程中的应用，考查的知识点有微生物的无菌操作、微生物的分离以及产品的提取，注意总结．