Question

13．运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种．这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，保护农业生态环境．

（1）将Bt毒蛋白基因从苏云金芽孢杆菌DNA中剪切出来的“分子手术刀”是限制酶，它能使双链DNA每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键键断开：该基因表达载体中除了Bt毒蛋白基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等．
（2）将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，题中所用的是农杆菌转化法．
（3）转基因抗虫油菜的培育是否成功，最简便的检测方法是用该油菜叶饲喂害虫．
（4）已知转基因油菜中杀虫蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡．而该杀虫蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞表面无（相应的）特异性受体．
（5）转基因油菜获得的抗虫性状是由Bt毒蛋白基因的表达 产物来体现的，苏云金芽孢杆菌中的Bt毒蛋白基因和油菜细胞中的Bt毒蛋白基因所控制合成的Bt毒蛋白在功能和氨基酸序列上是相同的．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）将目的基因（Bt毒蛋白基因）从外源DNA中剪切出来的“分子手术刀”是限制酶，它能使双链DNA每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开；基因表达载体的组成包括目的基因（Bt毒蛋白基因）、启动子、终止子以及标记基因等．
（2）由图可知，题中将目的基因导入受体细胞的方法农杆菌转化法．
（3）转基因抗虫油菜的培育是否成功，最简便的检测方法是用该油菜叶饲喂害虫，若害虫死亡则说明培育成功．
（4）已知转基因油菜中杀虫蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡．而该杀虫蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞表面无（相应的）特异性受体．
（5）转基因油菜获得的抗虫性状是由Bt毒蛋白基因的表达产物来体现的，苏云金芽孢杆菌中的Bt毒蛋白基因和油菜细胞中的Bt毒蛋白基因所控制合成的Bt毒蛋白在功能和
氨基酸序列上是相同的．
故答案为：
（1）限制酶     磷酸二酯键     标记基因
（2）农杆菌转化法
（3）用该油菜叶饲喂害虫
（4）无（相应的）特异性受体
（5）抗虫性状    氨基酸

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．