Question

【题目】已知多酚氧化酶能催化化学反应：儿茶酚+氧气→苯醌+水的进行，某研究组开展了多酚氧化酶研究实验，实验步骤如下：

①多酚氧化酶制备:

称取一定质量的马铃薯块茎，用匀浆机打碎制成匀浆并过滤得滤液，滤液在用一定浓度的硫酸铵处理

多次，离心收集沉淀，沉淀溶于一定浓度的磷酸缓冲液，获得酶液。

②酶活性测定

在10个反应杯中分别加入 的儿茶酚溶液，然后在1号反应杯中加入 ，以此类推，10号反应杯中加入20μL的酶液（初始量为2μL的酶液），然后在相同时间内利用测氧仪测定实验数据，并分析。

请分析下列问题：

（1）在多酚氧化酶制备步骤中，一定浓度的硫酸铵的作用是 。

（2）将实验步骤中酶活性测定的内容补充完整： ， 。

（3）本实验的因变量是 。

（4）试预测实验可能出现的三种实验结果：

① 。

② 。

③ 。

Answer 1

【答案】

（1）去除杂质提纯酶同时保证酶不变性

（2）等量 2μL酶液加18μL磷酸盐缓冲液

（3）单位时间耗氧量

（4）随着酶量增加，单位时间耗氧量不变

随着酶量增加，单位时间耗氧量增加

随着酶量增加，单位时间耗氧量先增加后保持不变

【解析】

（1）本实验需要具有活性的酶，所以一定浓度的硫酸铵的作用是去除杂质提纯酶同时保证酶不变性。

（2）本实验的自变量是不同量的多酚氧化酶，所以在10个反应杯中反应底物量应相同。因反应体系的量要保持相同，初始量为2μL的酶液，又因为在酶制备中可知，酶液是用磷酸缓冲液配制，所以1号反应杯中应加入2μL酶液加18μL磷酸盐缓冲液。

（3）根据实验步骤可知，本实验的因变量是单位时间耗氧量

（4）因为不知反应底物量的多少和酶量的多少，所以可能出现的结果有：如果底物量少，酶量多，则一开始就达到最大反应速率，所以随着酶量增加，单位时间耗氧量不变；如果底物量很大，则随着酶量增加，单位时间耗氧量增加；如果底物量有限，则随着酶量增加，单位时间耗氧量先增加后不变