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    20．如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答．

    （1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？不能．为什么？皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA．
    （2）过程②必需的酶是逆转录酶，过程③除了用解旋酶外，还可以用加热变性的方法．
    （3）在利用A、B获得C的过程中，通常用同种限制酶切割A和B，使它们产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶，才可形成C．
    （4）如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体就叫做这种生物的cDNA文库．
    （5）一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因．

    分析 mRNA是基因表达时转录的产物，依照DNA作为模板，以碱基互补配对原则合成mRNA．所以细胞内产生某种mRNA的必要条件是该基因正在表达．但是人体的皮肤细胞显然不会表达胰岛素的基因，所以正常的人体皮肤细胞里是没有mRNA的．

    解答 解：（1）不能用皮肤细胞，过程1是从细胞中提取mRNA，这需要胰岛细胞中提取出mRNA．人体的皮肤细胞高度分化，皮肤细胞没有选择性表达出胰岛素基因的mRNA，所以不能表达出胰岛素的mRNA．
    （2）过程②表示的为逆转录过程，遗传信息传递为mRNA→DNA，因此需要的酶为逆转录酶．过程③由双链DNA形成单链DNA的过程，需要解旋酶和 ATP．
    （3）构建基因表达载体的过程中，必须用相同的限制酶切割A（含目的基因的外源DNA分子）和B（运载体）以产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成C（重组DNA分子）．
    （4）由于生物个体发育过程中，基因是选择性表达的，因此细胞中的mRNA是部分基因转录形成的，则通过逆转录方法合成的目的基因只包含该生物的部分基因，这个受体菌群体就叫做这种生物的cDNA文库．
    （5）基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、终止子和标记基因．
    故答案为：
    （1）不能 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA
    （2）逆转录 解旋
    （3）DNA连接酶
    （4）cDNA
    （5）启动子   标记基因

    点评 此题要求学生对中心法则中的相关过程（DNA复制、转录、翻译、逆转录、RNA复制）理解并能灵活运用，对于学生一定多注意DNA复制过程中相关计算问题，在这道题目中可看出基因工程中PCR技术也会涉及到这些计算．

    练习册系列答案
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