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    肺细胞中的let一7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌．研究人员利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞实现表达增强后，发现肺癌细胞的增殖受到抑制．该基因工程技术基本流程如图1．

    （1）进行过程①时，需用
     
    酶切开载体以插入let一7基因．进行过程②时，需用
     
    酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于细胞培养．采用PCR技术扩增let一7基因时，在PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等，若在该反应体系中，目的基因扩增了5代，则具有引物I的DNA所占的比例理论上为
     
    ．
    （2）研究发现，let一7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2．据图分析，可从细胞中提取
     
    进行分子杂交，以直接检测1et一7基因是否转录．肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中
     
    （RASmRNA/RAS蛋白质）含量减少引起的．
    （3）现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子，说明此DNA分子的形态为
     
    ．
    （4）某线性DNA分子分别用限制酶HindⅢ和Sma I处理，然后用这两种酶同时处理，得到如下片段（kb为千个碱基对）：
    限制酶     片段及长度
    HindⅢ     2.5kb，5.0kb
    Sma I     2.0kb，5.5kb
    Hind 1Ⅲ和Sma I     2.5kb，3.0kb，2.0kb
    可以推知限制酶HindⅢ和Sma I在此DNA分子中分别有
     
    个识别序列．两酶同时处理后得到的片段，再用限制酶EcoR I处理，结果导致凝胶上3.0kb的片段消失，产生一种1.5kb的新片段；那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I将该线性DNA分子进行切割，则可得到长度分别为
     
    的片段．
    考点：基因工程的应用
    专题：
    分析：分析题图：图1表示利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞的流程，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示用胰蛋白酶处理组织细胞，使之成为单个细胞，再加细胞悬液进行细胞培养的过程．图2表示let一7基因影响癌基因RAS的表达的机理，let一7基因是通过影响转录来影响癌基因RAS表达的．
    分析表格：分别用限制酶HindⅢ和Sma I处理后得到的都只有2个片段，同时用限制酶HindⅢ和Sma I处理后得到3个片段，说明这个DNA分子中都只有1个它们的酶切位点．
    解答： 解：（1）基因工程中用到的基因剪刀是限制性核酸内切酶．要将组织细胞分散开需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理．目的基因扩增了5代，共得到32个DNA分子，除了含有模板DNA链的1个DNA分子外，其余的DNA分子都含有引物I，因此占31/32．
    （2）由图2可以看出let一7基因是通过影响转录来影响癌基因RAS表达的，因此从细胞中提取RNA进行分子杂交，以直接检测1et一7基因是否转录．影响转录后RAS蛋白质不能合成，含量会减少．
    （3）一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的一个DNA分子，说明该DNA分子是环状的．
    （4）由表格信息可知分别用限制酶HindⅢ和Sma I处理后得到的都只有2个片段，说明这个DNA分子中都只有1个它们的酶切位点．限制酶EcoR I处理，凝胶上3.0 kb的片段消失，产生一种1.5 kb的新片段，说明在这段DNA正中间含有一个EcoR I酶酶切位点，综合表格信息可知该DNA片段共有7.7kb，在2.5kb处有HindⅢ酶切位点，在5.5kb处有Sma I酶切位点，在4.0kb处有EcoR I酶切位点，因此用限制酶HindⅢ和EcoR I将该线性DNA分子进行切割，可得到2.5 kb、1.5 kb、3.5 kb的片段．
    故答案：
    （1）限制性核酸内切酶     胰蛋白         31/32
    （2）RNA        RAS蛋白质
    （3）环状
    （4）1、1               2.5 kb、1.5 kb、3.5 kb
    点评：本题结合图表，考查基因工程的相关知识，意在考查考生分析图表提取有效信息的能力；能理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确判断和得出正确结论的能力．
    练习册系列答案
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    亲本组合 F1株数 F2株数
    紫色叶 绿色叶 紫色叶 绿色叶
    ①紫色叶×绿色叶 121 0 451 30
    ②紫色叶×绿色叶 89 0 242 81
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    B、组合①的两个亲本基因型一定为AABB和aabb
    C、理论上组合①的F2紫色叶植株中，纯合子所占比例
    1
    4
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    D、演替至第4年时各种鱼类个体数才达到K值

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    【生物一现代生物科技专题】
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    （1）在辽宁绒山羊细胞中获取的IGF-I基因在导入胚胎干细胞之前须
     
    ，这是基因工程操作的核心步骤，该操作过程必需的工具酶是
     
    ，将IGF-I基因导入胚胎干细胞最有效的方法是
     

    （2）转基因胚胎干细胞培养过程常在培养液中加人一定量的
     
    ．以防培养过程中的污染；同时在使用合成培养基时，为保证细胞正常生长，在培养基中还要添加
     
    等天然成分．
    （3）干细胞经扩大培养诱导分化为早期胚胎，随后即可植入
     
    的代孕母羊体内．为提高胚胎利用率，还可以采用
     
    技术以获得更多的转基因克降绒山羊幼仔．
    （4）请列举至少两种转基因克隆绒山羊培育过程中采用的现代生物技术：
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    生物--选修1  生物技术实践
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    （1）提取橘皮精油，常采用
     
    法而不用蒸馏法，原因是水中蒸馏会导致
     
    ．
    （2）为了提高出油率，首先将橘皮
     
    ，并用石灰水浸泡，石灰水的作用是
     
    ．
    （3）压榨过程中为了使橘皮油易与水分离，常加入相当于橘皮质量一定百分比的
     
    ，并调节pH值至
     
    ．
    （4）将压榨液过滤除去固体物和残渣后，用
     
    法进一步除去质量较小的残留固体物，并分离出上层的橘皮精油．将分离出，的橘皮油在5℃～10℃下静置5～7天，使
     
    ，用吸管吸出上层澄清橘皮油，其余部分再次过滤．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    当植物缺水时光合作用速率将下降，有人通过实验对有关的生理机制进行了探究．实验前植株正常灌水，并给予正常光照及其他理想条件．自实验开始后，除实验组 停止灌水令土壤逐渐干旱外，其他条件均不变．于停水处理后的第一天开始，每3d取样 一次（早晨8：30-9：30取样，叶片取自幼苗顶端第5至第6片叶），分别测定叶片光合色 素含量、胞间CO2浓度、叶片光合速率等数据，并绘制图象如下：（a曲线为对照组、b曲 线为实验组）

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    ．
    （2）据图分析，O-6天内，丙图中b曲线下降的原是
     
    ；6天后，乙图中b曲线上升的原因是
     
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    ，此时增加光照
     
     （能/不能）使五碳化合物含童迅速恢复．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    2012年诺贝尔化学奖授予在G蛋白偶联受体领域作出杰出贡献的科学家．G蛋白偶联受体调控着细胞对激素、神经递质的大部分应答．如图表示甲状腺细胞膜内侧的G蛋白与促甲状腺激素受体结合，形成G蛋白偶联受体后被活化，进而引起细胞内一系列代谢变化．请回答：

    （1）促甲状腺激素是由
     
    分泌的，图中“功能蛋白A”的生物效应是促进
     
    的合成和分泌．
    （2）过程①需要细胞质为其提供
     
    作为原料，催化该过程的酶是
     
    ．
    （3）过程②除了图中已表示出的条件外，还需要
     
    （至少写出2项）．一个mRNA上结合多个核糖体的意义是
     
    ．
    （4）科研人员发现有些功能蛋白A分子量变小，经测序表明这些分子前端氨基酸序列正确，但从某个谷氨酸开始以后的所有氨基酸序列丢失，则功能蛋白A基因转录的模板链上相应位置碱基发生的变化是
     
    （已知谷氨酸密码子：GAA、GAG，终止密码子：UAA、UAG、UGA）．
    （5）DNA分子经过诱变，某位点上一个正常碱基（设为P）变成了尿嘧啶．该DNA连续复制两次，得到4个子代DNA分子，相应位点上的碱基对分别为U-A、A-T、G-C、C-G，推测“P”可能是
     
    或
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    高等动物细胞内的某结构，经检测其内含有核酸、蛋白质等物质，且在新陈代谢过程中该结构既能消耗水，又能产生水，既能消耗ATP又能产生ATP，则该结构（　　）
    A、产生的ATP主要用来进行暗反应合成糖类等有机物
    B、能用光学显微镜观察，但是需要用甲基绿将其染成绿色
    C、可能是线粒体，但进行有氧呼吸的生物细胞不一定含有该结构
    D、可能是细胞质基质，在此处进行呼吸作用可以产生二氧化碳

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列关于各种生物膜的说法正确的是（　　）
    A、线粒体内膜附着有大量与有氧呼吸有关的酶，是线粒体中生成ATP的主要场所
    B、突触后膜上的受体与神经递质发生特异性结合后将神经递质输入细胞
    C、突触前膜通过主动运输将神经递质分泌到突触间隙
    D、叶绿体囊状结构薄膜上附着有大量与光合作用有关的酶，是叶绿体中生成光合产物的主要场所

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