现有金黄色的葡萄球菌.硝化细菌和圆褐固氮菌3种细菌的混合物.某研究性学习小组的同学拟通过下面的实验把它们分离开.并获得纯种.请完善下列实验方案并回答相关问题．(1)实验步骤:①配制三种固体培养基A.B.C.分别控制A加入高浓度的食盐,B无氮源,C无有机碳源.其他条件均满足生长要求.将这三种培养基分别分成两份.依次标上A1和A2.B1和B2.C1和C2� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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12．现有金黄色的葡萄球菌、硝化细菌和圆褐固氮菌3种细菌的混合物，某研究性学习小组的同学拟通过下面的实验把它们分离开，并获得纯种，请完善下列实验方案并回答相关问题．
（1）实验步骤：
①配制三种固体培养基A、B、C，分别控制A加入高浓度的食盐；B无氮源；C无有机碳源，其他条件均满足生长要求，将这三种培养基分别分成两份，依次标上A₁和A₂、B₁和B₂、C₁和C₂．
②在培养基A₁、B₁、C₁中分别接种三种细菌的混合物，放在适宜的条件下培养3～4d．
③挑取A₁、B₁、C₁上的正常生长的菌落中的菌，分别接种在培养基A₂、B₂、C₂上，放在适宜的条件下培养3～4d．
（2）结果预测：
在A₁培养基上存活的是金黄色葡萄球菌，在B₁培养基上存活的是圆褐固氮菌，在C₁培养基上存活的是硝化细菌．
（3）实验步骤③的目的是对分离的菌种进一步纯化．

分析筛选和分离微生物需要使用选择培养基．金黄色葡萄球菌属于耐盐细菌，可以用含高浓度的氯化钠的选择培养基筛选，硝化细菌属于化能自养型细菌，可以用含氨的而不含碳源的培养基筛选，圆褐固氮菌属于自生固氮菌，可以用不含氮源的选择培养基进行筛选．生物实验遵循的一般原则主要有对照原则、等量原则、单一变量原则和控制无关变量原则等．据此分析作答．

解答解：（1）实验步骤：①根据三种微生物的特点分别配置A、B、C加入高浓度的食盐、无氮源和无有机碳源的选择培养基．其他条件均满足生长要求，将这三种培养基分别分成两份，依次标上A₁和A₂、B₁和B₂、C₁和C₂．
②根据题意，在培养基A₁、B₁、C₁中分别接种三种细菌的混合物进行选择培养，放在适宜的条件下培养3～4d．
（2）结果预测：金黄色葡萄球菌属于耐盐细菌，能够在A₁培养基上存活；圆褐固氮菌属于自生固氮菌，能够在B₁培养基上存活；硝化细菌属于化能自养型细菌，能够在C₁培养基上存活．
（3）实验步骤③的目的是对筛选分离的菌种进行进一步纯化．
故答案为：
（1）①加入高浓度的食盐无氮源无有机碳源
②三种细菌的混合物
（2）金黄色葡萄球菌圆褐固氮菌硝化细菌
（3）对分离的菌种进一步纯化

点评本题通过实验主要考查微生物的筛选与分离，意在强化学生对相关微生物的特点的识记与微生物的筛选及实验的分析的理解与掌握．题目难度中等．

练习册系列答案

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科目：高中生物 来源： 题型：解答题

2．某生物兴趣小组的同学利用新鲜葡萄榨取果汁并制作葡萄酒，简要流程如下：

（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌．榨汁前需要除去枝梗，此操作是在冲洗之后（填“前”或“后”）的进行的．
（2）葡萄酒的颜色通常呈现深红色，原因是随着酒精度数的提高，红葡萄皮的色素进入发酵液．酒精发酵时的温度一般在18-25℃．
（3）为提高果酒的品质，更好地抑制其他微生物的生长，除接入合适的菌种外，还应对原料和装置分别进行消毒和灭菌．
（4）利用果酒可以制作果醋，制作果醋时利用的微生物是醋酸菌，最适生长温度是30-35℃．当缺少糖源时，该生物将乙醇变为己醛，最终变为醋酸．

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科目：高中生物 来源： 题型：解答题

3．图乙表示图甲所示池塘受污染后在人为干预下恢复过程的能时流动图（单位为10³kJ/m³•y）．请回答：

（1）该池塘的不同水层分布着不同的生物，属于群落的空间（垂直和水平）结构，影响该结构的主要环境因素是光．
（2）输入该生态系统的能量是生产者光合作用固定的太阳能，第一营养级的同化量110×10³kJ/m²•y，第一营养级到第二营养级的能量传递效率为12.7%（保留一位小数）．
（3）图乙中A表示在呼吸作用中散失的能量．
（4）该池塘被轻微污染后，通过自身的净化作用（自我调节能力），很快恢复到接近原来的状态．随着时间的推移，池塘内物种的数目即丰富度不断提高．

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科目：高中生物 来源： 题型：选择题

20．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是（　　）
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢
②接种操作要在酒精灯火焰附近进行
③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒
④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌
⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌
⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌．

A．

①③

B．

②④

C．

③⑤

D．

④⑥

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科目：高中生物 来源： 题型：解答题

7．

科研人员将赤霉菌培养液喷洒到水稻幼苗上，水稻患恶苗病（植株疯长）．经检测，赤霉菌培养液中有以上效应的物质是赤霉素．
（1）上述实验的结论是赤霉素使水稻患恶苗病（水稻植株疯长）．
（2）由此能证明赤霉素是植物激素吗？为什么？
不能，该实验没有证明植物能产生赤霉素．
（3）赤霉素促进茎的伸长主要与细胞壁的伸展性有关．细胞在持续生长过程中，细胞壁将发生一定变化，出现这种现象的原因是由于高尔基体（填细胞器）为细胞壁添加了新的成分．用赤霉素多次喷洒水稻植株后，引起其生长速度过快，将导致稻谷产量减少（增加、减少）．
（4）科研人员用Ca²⁺和赤霉素对某植物种子胚轴进行了生长速率影响的实验，结果如右图所示．由图可知，一定浓度的Ca²⁺对胚轴的生长具有抑制作用．根据（3）、（4）判断，赤霉素促进茎伸长的可能原因是赤霉素能抑制Ca²⁺的作用或能消除细胞壁中的Ca²⁺．

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科目：高中生物 来源： 题型：解答题

17．Ⅰ．光呼吸是进行光合作用的细胞在光照和O₂/CO₂值异常时发生的一种生理过程（图甲所示），该过程是细胞在Rubisco酶的催化下，消耗O₂，生成CO₂，借助叶绿体、线粒体等多种细胞器共同完成的消耗能量的反应．请回答下列问题．

（1）Rubisco酶既能催化C₅和CO₂反应，又能催化C₃和O₂反应，可以推测$\frac{O{\;}_{2}}{CO{\;}_{2}}$值偏高（“偏高”或“偏低”）时有利于光呼吸而不利于光合作用．
（2）在高温、干旱和强光照条件下，植物的蒸腾作用很强，叶片气孔大量关闭，CO₂的供应量减少，植物可通过光呼吸为光合作用提供的物质为CO₂和C₃．
（3）据图可知，光呼吸和光合作用都能利用的物质是C₅，光合作用利用该物质的场所叶绿体基质，光呼吸中生成CO₂的场所线粒体（或线粒体基质）．
（4）与光呼吸相区别，研究人员常把细胞呼吸称为“暗呼吸”，从反应条件来讲光呼吸与暗呼吸的不同是光呼吸需要光，而暗呼吸有光或无光均可．
Ⅱ．科学家测定不同温度下某植物对CO₂的吸收速度如图乙所示．
（1）据图可知，导致A、B丙点植物CO₂吸收速度相等的外界因素是温度和光照强度．A点的总光合作用速率＜（“＞”“＜”或“=”）B点的总光合作用速率．
（2）在15℃，1klx条件下，植物5小时吸收CO₂0.1mol．

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科目：高中生物 来源： 题型：填空题

4．（1）限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列．
（2）如图1所示的酶M和酶N是两种限制酶，图中DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其它碱基的种类未作注明．
（3）酶M特异性剪切的DNA片段是

，则酶N特异性剪切的DNA片段是

．
（4）多个片段乙和多个片段丁混合在一起，用DNA连接酶拼接得到环状DNA，其中只由两个DNA片段连接成的环状DNA分子有3种．
（5）如图2的A和B分别表示两段DNA序列．表格分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点．

酶的种类	1	2	3	4
酶切位点

（6）据图2：假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图2中A所示，则应选择表格中酶2进行酶切；若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图2中A和B所示，则应选择表中酶2和3进行酶切．
（7）假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图2中B所示，请在图3方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列．