如表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方数据表.据此回答下列问题:培养基配方含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4•7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g将上述物质溶解后.用蒸馏水定容到1000mL(1)培养微生物的培养基中.一般都含有碳源.氮源.水和无机盐等营养物质．若用于培养乳酸菌.培养基中除上述营养物质外.� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

3．如表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方数据表，据此回答下列问题：

培养基配方	含量
KH₂PO₄	1.4g
Na₂HPO₄	2.1g
MgSO₄•7H₂O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
琼脂	15.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

（1）培养微生物的培养基中，一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质．若用于培养乳酸菌，培养基中除上述营养物质外，还需要添加维生素．细菌能利用尿素作为氮源，是由于其能合成脲酶．
（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入酚红指示剂．接种前一般采取高压蒸汽法对培养基进行灭菌．
（3）某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为10⁵的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为161、155、158、170个，则每毫升原土壤样液中尿素分解菌的数量为1.61×10⁸．某同学在纯化土壤中的尿素分解菌时，培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）．
（4）常采用甘油管藏法将纯化得到的目的菌长期保存．

分析 1、培养基营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件．
2、无菌技术：消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

3、菌种保存

	临时保存法	甘油管藏法
适用对象	频繁使用的菌种	长期保存的菌种
培养及类型	固体斜面培养基	液体培养基
温度	4℃	-20℃
方法	菌落长成后于冰箱中保存，每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上	将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于冷冻箱内保存
缺点	菌种易被污染或产生变异	\\

解答解：（1）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素．细菌能利用尿素作为氮源，是由于其能合成脲酶．
（2）在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入酚红指示剂．对培养基进行灭菌一般采用高压蒸汽灭菌法．
（3）某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为10⁵的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为161、155、158、170个，则每毫升原土壤样液中尿素分解菌的数量为$\frac{161+155+158+170}{4}$×$\frac{1}{0.1}$×10⁵=1.61×10⁸．某同学在纯化土壤中的尿素分解菌时，培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）．
（4）长期保存菌种常采用甘油管藏法．
故答案为：
（1）水和无机盐维生素脲
（2）酚红高压蒸汽法
（3）1.61×10⁸菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）
（4）甘油管藏

点评本题考查微生物分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法，掌握无菌技术；识记培养基的基本成分、种类及功能；识记菌种保藏的方法，能结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案

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