Question

13．如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位．已知目的基因的两端均有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞．下列有关叙述正确的是（　　）

• A． 将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种
• B． DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来，形成一个重组质粒时形成两个磷酸二酯键
• C． 为了防止目的基因反向连接和质粒自行环化，酶切时可选用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ
• D． 能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞

Answer 1

分析 分析题图：该图示为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，P为转录的启动部位，此外该质粒上还有青霉素抗性基因和四环素抗性基因为标记基因．受体细胞为无任何抗药性的原核细胞，青霉素抗性基因和四环素抗性基因上没有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，如果受体细胞能在含青霉素的培养基中生长，表明该质粒或重组质粒已成功导入该细胞．据此答题．

解答 解：A、DNA连接酶只能将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来，因此将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRI酶切，在DNA连接酶作用下，生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有3种，即质粒与质粒连接、目的基因与目的基因连接、目的基因与质粒连接，A错误；
B、DNA连接酶的作用是将酶切后得到的具有相同末端的DNA片段连接起来，形成一个重组质粒时形成4个磷酸二酯键，B错误；
C、EcoRI和BamHI切割形成的黏性末端不同，而DNA连接酶只能将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来，因此为了防止目的基因反向粘连和质粒自行环化，酶切时可选用的酶是EcoRI和BamHI，C正确；
D、导入普通质粒的受体细胞和导入重组质粒的受体细胞都能在含青霉素的培养基中生长，因此能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞不一定含有目的基因，D错误．
故选：C．

点评 本题结合某质粒图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合图中信息准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．