Question

【题目】回答下列（一）、（二）小题

（一）研究小组从土壤中筛选以多环芳烃（PAHs）为碳源和能源的细菌，用以降解工业废水和生活污水中的PAHs。请回答：

（1）为了从土壤中筛选PAHs降解菌，需配制以____________为唯一碳源的培养基，培养基经________[A. 121℃（500g/cm2 压力），15min B. 90℃（500g/cm2压力），15min C. 121℃（lkg/cm2压力），15minD. 90℃（500g/cm2压力），30min]髙压蒸汽灭菌，待冷却至60℃后倒平板。

（2）倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是____________。在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则这个平板不能用来培养PAHs降解菌，原因是________________________。

（3）制备土壤稀释液，用____________方法接种于固体培养基表面，培养时，需将培养皿____________并放在37℃恒温培养箱中培养24h。

（4）用划线法纯化PAHs降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时，须从上一次划线的末端开始划线，原因是____________________________________。

（二）下图为某大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛的大致过程，请据图回答问题：

（1）图中获得赖氨酸基因常用的酶是____________________，若我们己知赖氨酸基因的碱基序列，一般釆用____________法获取该目的基因。

（2）黑白花奶牛乳腺组织常用____________分散成单细胞，然后作为核供体。将得到的体细胞的细胞核移植到去核的未受精的卵细胞中才能发育成新个体，其原因是____________（A.卵细胞大，便于操作B.卵细胞含有的营养物质多 C.卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达 D.重组细胞才具有全能性）。

（3）从④到⑤的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎，常采用的方法是进行____________。

（4）克隆牛的诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有：____________、____________。

Answer 1

【答案】 PAHs C 防止杂菌污染 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生 涂布 倒置 使细菌数随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落 限制性核酸内切酶 化学合成 胰蛋白酶 C 胚胎分割 核移植技术 胚胎分割

【解析】试题分析：熟记并理解微生物的实验室培养等相关基础知识，形成清晰的知识网络；在此基础上，从题意中提取信息并对（一）题进行作答。以图示中的文字信息和箭头指向为切入点，围绕目的基因的获取、动物细胞培养、核移植技术、胚胎分割技术等相关知识，结合问题情境，对（二）题进行解答。

（一）(1) 从土壤中筛选PAHs降解菌，需配制以PAHs为唯一碳源的培养基，培养基经C选项所示的121℃（lkg/cm2压力）、15min的髙压蒸汽灭菌，待冷却至60℃后倒平板。

(2) 倒平板时，为了防止杂菌污染，应使锥形瓶的瓶口通过火焰。在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则可能导致空气中的微生物在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此这个平板不能用来培养PAHs降解菌。

(3) 制备土壤稀释液，用涂布方法接种于固体培养基表面。培养时，为了防止培养皿被污染，需将培养皿倒置并放在37℃恒温培养箱中培养24h。

(4) 用划线法纯化PAHs降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时，须从上一次划线的末端开始划线，原因是：使细菌数随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而成的菌落。

（二）(1)图中的赖氨酸基因为目的基因，获得目的基因常用限制性核酸内切酶。若我们己知赖氨酸基因的碱基序列，一般釆用化学合成法获取该目的基因。

(2)常用胰蛋白酶处理黑白花奶牛乳腺组织，使其分散成单细胞，然后作为核供体。由于C选项所示的卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达，所以需将得到的体细胞的细胞核移植到去核的未受精的卵细胞中才能发育成新个体。

(3)从④到⑤的过程，常采用胚胎分割技术，以获得较多的遗传同质早期胚胎。

(4)分析图示可知，克隆牛的诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有：核移植技术、胚胎分割技术。