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    20．根据以下探究影响酶活性因素的实验，回答问题．
    Ⅰ．为验证pH对唾液淀粉酶活性的影响，实验操作步骤如下：
    ①在1～5号试管中分别加入0.5%的唾液1mL．
    ②加完唾液后，向各试管中加入相应的缓冲液3mL．使各试管中的pH依次稳定在5.00、6.20、6.80、7.40、8.00．
    ③分别向1～5号试管中加入0.5%的淀粉液2mL，然后放入37℃温水中恒温水浴．
    ④反应过程中，每隔1min从第3号试管中取出一滴反应液滴在比色板上，加1滴碘液显色．待呈橙黄色时，立即取出5支试管，加碘液显色并比色，记录结果如表所示：
    项目12345
    pH5.006.206.807.408.00
    颜色+++橙黄色+++
    注：“+”表示蓝色程度．
    （1）实验设计中，因变量是颜色变化．实验过程中选择37℃恒温的理由是保证温度恒定，排除温度对实验过程的干扰；37℃是唾液淀粉酶的最适催化温度．
    （2）3号试管加碘液后出现橙黄色，说明淀粉已经完全分解．
    （3）如果反应速率过快，应当对唾液进行怎样的处理？适当稀释唾液．
    （4）该实验得出的结论是唾液淀粉酶催化的最适pH是6.80，高于或低于此值，酶的活性都会降低．
    Ⅱ．为探究高温对酶活性的影响，某同学设计了如下实验：
    实验步骤与结果：
    （1）①取两支洁净的试管，编号为1和2．
    ②在1号试管中加入2mL 3%的新鲜过氧化氢溶液，2号试管中加入1mL 20%的新鲜肝脏研磨液，分别置于100℃恒温水浴5分钟．
    ③将2号试管中的肝脏研磨液加入1号试管，振荡摇匀，再置于100℃恒温水浴5分钟，结果未观察到气泡产生．
    （2）结果分析：推断观察不到气泡产生的可能原因：高温使过氧化氢酶变性，失去活性、高温使底物过氧化氢全部分解．

    分析 1、实验课题为“验证pH值对唾液淀粉酶活性的影响”，因此自变量为pH值，因变量为淀粉分解的速度，温度、淀粉液的量、唾液的量等均属于无关变量，实验过程中无关变量要保持相同且适宜．
    2、实验课题为探究高温对酶活性的影响，因此自变量是温度，因变量是酶的活性，其余为无关变量．

    解答 解：Ⅰ．（1）该实验的目的是验证pH值对唾液淀粉酶活性的影响，因此自变量为pH值，因变量是颜色变化，则温度为无关变量，无关变量要保持相同且适宜，因此实验过程选择37℃恒温是为了排除温度因素对结果的干扰，而且37℃是人体正常的体温，也是人体内酶的最适温度．
    （2）由于淀粉遇碘液变蓝，而3号试管加碘液后出现橙黄色，说明淀粉已被完全分解．
    （3）反应速率较快时，可对唾液加水进行适当稀释，从而减慢反应速率．
    （4）实验结论：唾液淀粉酶最适pH值是6.8，高于或低于此pH时，酶活性逐渐降低．
    Ⅱ．（2）新鲜的肝脏研磨液中含有过氧化氢酶，但放置在100℃恒温水浴5分钟，酶有可能已经失活，故不会产生气泡．过氧化氢自身在高温下会分解较快，因此也有可能是在高温下已经分解完，故加入酶后看不到气泡．
    故答案为：
    Ⅰ．（1）颜色变化       保证温度恒定，排除温度对实验过程的干扰； 37℃是唾液淀粉酶的最适催化温度
    （2）淀粉已经完全分解      
    （3）适当稀释唾液
    （4）唾液淀粉酶催化的最适pH是6.80，高于或低于此值，酶的活性都会降低
    Ⅱ．（2）高温使过氧化氢酶变性，失去活性；高温使底物过氧化氢全部分解（或过氧化氢酶变性  底物被全部分解）

    点评 本题考查影响酶活性的因素的相关探究实验，对于此类试题，需要考生明确实验的目的，能正确区分自变量、因变量和无关变量，能根据探究实验的单一变量原则和对照原则完善实验步骤，并能根据实验现象得出实验结论．

    练习册系列答案
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    （1）题目中说的“克隆”实际上指的是PCR技术．
    （2）获取目的基因后需要进行基因表达载体的构建，构建完成的表达载体中需含有启动子、终止子、复制原点、标记基因和目的基因．
    （3）紫花苜蓿为双子叶植物，常用的导入目的基因的方法是农杆菌转化法．
    （4）对于目的基因的检测与鉴定，可以进行分子水平的检测，三种检测方法分别有DNA分子杂交、DNA-mRNA杂交、抗原一抗体杂交；若进行个体水平的检测，需将该植株栽培于干旱、盐碱和贫瘠环境中，以观察其生长状况．
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