Question

16．已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶．脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产．请回答下列有关问题：
（1）微生物A产生的油脂不易挥发，可选用萃取法（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）提取．观察菌体中的油脂时，通常可用苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染色．
（2）为了从自然界中筛选微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，选用以油脂为碳源的固体（填“固体”或“液体”）培养基进行培养．
（3）若要测定培养液中微生物B的活菌数量，常用稀释涂布平板  法进行计数；与实际的活菌数相比，计数结果往往偏小（填“偏大”、“相同”、“偏小”）．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下，降解l0g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，上述三个温度中，45℃条件下该酶活力最小．为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实验．

Answer 1

分析 植物有效成分的提取可用蒸馏法、压榨法或萃取法，因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取．
植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源，培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌，测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数或稀释涂布平板法．
分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值．

解答 解：（1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，可选用压榨法或萃取法提取．脂肪可被苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）染成橘黄色（红色）故显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色．（2）筛选产脂肪酶的微生物B时，应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生物不能生存的选择培养基，培养基中应该添加脂肪作为唯一碳源，选择培养基为固体培养基．
（3）若要测定培养液中微生物B的活菌数量，常用稀释涂布平板  法进行计数；采用平板计数法获得的菌落有可能是由多个细菌形成的，所以往往少于实际的活菌数．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，45℃条件下该酶活力最小，该酶的最适温度为40℃左右，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实验．
故答案为：
（1）萃取法  苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）
（2）油脂  固体
（3）稀释涂布平板  偏小    
（4）45  40

点评 本题主要考查植物有效成分的提取，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断．