Question

【题目】下图表示培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。请据图回答:

(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有_____________(答出两点即可)。图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用____和____限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是____。

(2)过程①可采用的操作方法是________。

(3)对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体,这利用了细胞的______性。

(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用________技术。

Answer 1

【答案】 能自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点 Hind Ⅲ BamHⅠ 启动子 显微注射法 全能 抗原-抗体杂交

【解析】分析题图，图示是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，包括基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、早期胚胎培养、胚胎移植等步骤，其中过程①是将重组质粒导入受体细胞；过程②需采用胚胎移植技术。

（1）质粒作为运载体，应具备的基本条件有：能自我复制、具有标记基因、能启动外源目的基因的转录和翻译、具有一个至多个限制酶切割位点等。质粒上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ的切割位点，外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ的切割位点，其中限制酶SmaⅠ的切割位点位于目的基因上，所以获取目的基因和构建基因表达载体时，应用限制酶HindⅢ和BamHⅠ。重组质粒上的启动子是能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列。

（2）根据以上分析已知，过程①是将重组质粒导入受体细胞（受精卵），常用显微注射法。

（3）胚胎分割技术的理论基础是细胞的全能性。

（4）目的基因成功表达的产物是人乳铁蛋白，可采用抗原-抗体杂交技术进行检测。