Question

【题目】RT－PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，可利用此技术获取目的基因，具体过程如图所示，以下说法错误的是 (　 　)

A. 设计扩增目的基因的引物时需考虑表达载体的序列

B. GC含量高的引物在与模板链结合时，需要更高的温度

C. 过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、Taq酶和引物A等

D. 过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上需要2n－1个引物B

Answer 1

【答案】C

【解析】

1、设计引物时，引物应当可以与表达载体两端的序列进行互补配对

2、PCR原理：利用DNA双链复制原理，将基因的核苷酸序列不断地加以复制，使其数量呈指数方式增加。

利用PCR技术扩增目的基因的前提是，要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，故A正确；GC对之间有三个氢键，GC含量高时稳定性高，所以需要更高的温度，故B正确；过程Ⅰ是逆转录过程，所以需要加入缓冲液、原料、逆转录酶酶和引物A等，故C错误；过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，根据DNA的半保留复制可知理论上需要2n－1个引物B，故D正确。