Question

【题目】复合型免疫缺陷症（SCID）患者缺失ada基囚．利用基因疗法将人正常ada基因转入患者自身T细胞．可改善患者的免疫功能．如图显示该基因疗法的两个关键步骤．回答下列问题：
（1）图中所示获取正常ada基因的方法是 ， 若要大量获取该基因，可通过PCR技术迸行扩增．与细胞内DNA复制过程相比，PCR技术的不同点有（答出两点）
（2）步骤②是 ． 在该步骤中，病毒作为起作用，需使用的工具酶有 ．
（3）完成步骤②后，在体外将人正常ada基因导入患者自身的T细胞．此后，在将该T细胞重新输入患者体内之前，还必须完成哪两项操作？

Answer 1

【答案】
（1）从基因文库中获取目的基因；不需要解旋酶、需要热稳定DNA聚合酶
（2）构建基因表达载体；运载体；限制酶和DNA连接酶
（3）将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达
【解析】解：（1）图中所示获取目的基因的方法是从基因文库中获取目的基因；与细胞内DNA复制过程相比，PCR技术的不同点有：不需要解旋酶、需要热稳定DNA聚合酶．（2）步骤②是构建基因表达载体．在该步骤中，病毒作为运载体起作用；构建基因表达载体时，首先需要限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子．（3）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．因此完成步骤②后，在体外将人正常ada基因导入患者自身的T细胞．此后，在将该T细胞重新输入患者体内之前，还必须完成的两项操作为：将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达． 所以答案是：（1）从基因文库中获取目的基因 不需要解旋酶、需要热稳定DNA聚合酶（2）构建基因表达载体 运载体 限制酶和DNA连接酶（3）将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达
【考点精析】认真审题，首先需要了解基因工程的原理及技术(基因工程的原理是利用DNA重组技术)．