Question

17．如图表示构建转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程．请据图回答问题：

（1）图示过程涉及的生物技术有转基因技术、动物细胞培养、动物细胞融合．
（2）要在分子水平上检测成功导入的人抗体基因在大鼠中是否成功表达，可采用抗原-抗体杂交方法，在构建的基因表达载体中，人抗体基因的首端必须有启动子，它是RNA聚合酶的识别和结合部位．
（3）向转基因小鼠注射特定的抗原后，从小鼠的脾脏中提取B淋巴细胞；②过程通常用聚乙二醇或灭活的病毒诱导．
（4）细胞X的特点是既能无限增殖又能产生特异性抗体．经选择性培养的细胞X，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养．培养过程中会产生接触抑制现象吗？否．

Answer 1

分析 分析题图：图示表示构建转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程，其中①表示基因表达载体的构建过程；②表示动物细胞融合过程（骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合）．

解答 解：（1）图示过程涉及的生物技术有转基因技术、动物细胞培养技术、动物细胞融合技术、体外受精技术等．
（2）检测目的基因是否表达常用抗原-抗体杂交法；基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成，因此在构建的基因表达载体中，人抗体基因的首端必须有启动子，它是RNA聚合酶的识别和结合部位．
（3）向转基因小鼠注射特定的抗原后，从小鼠的脾脏中提取B淋巴细胞；诱导动物细胞融合的方法包括物理法（离心、振动和电刺激）、化学法（聚乙二醇）和生物法（如灭活的病毒）．
（4）细胞X是骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞融合而成的杂交瘤细胞，其特点是既能无限增殖又能产生特异性抗体．经选择性培养的细胞X，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养．杂交瘤细胞可以无限增殖，因此培养过程中不会出现接触抑制现象．
故答案为：
（1）转基因技术  动物细胞培养  动物细胞融合
（2）抗原-抗体杂交  启动子  RNA聚合酶的识别和结合  
（3）B淋巴细胞   聚乙二醇或灭活的病毒  
（4）既能无限增殖又能产生特异性抗体      克隆化培养     否

点评 本题结合构建转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程图，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的基本操作步骤；识记动物细胞融合的方法及应用，能结合所学的知识准确答题．