Question

5．科学家从某无限增殖的细胞中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景．请回答下列问题：：
（1）利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体，常用聚乙二醇、灭活的病毒、电激等诱导因素诱导细胞融合．再经多次筛选和细胞培养获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞．
（2）有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，请完成设计方案：
①取特定抗原刺激的B淋巴细胞的细胞核，移植到去核的能够无限增殖的细胞中，构成重组细胞．（假定移植后细胞核中基因的表达状态不受影响）
②将重组细胞在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，以获得大量单克隆抗体．
（3）也有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因（prG）来制备单克隆抗体，其思路如图所示．
①酶A是指限制性核酸内切酶，酶B是指DNA连接酶．
②图中Ⅰ表示目的基因（无限增殖调控基因或prG），对Ⅱ进行检测与鉴定的目的检测目的基因是否导入和是否表达，Ⅲ具有的特点是既能无限增殖，又能产生特定抗体．

Answer 1

分析 据图分析，用酶A（限制酶）处理供体DNA分离出无限增殖调控基因，用同种限制酶切割质粒形成相同的黏性末端，用酶B（DNA连接酶）处理形成重组质粒，导入Ⅱ（效应B细胞），形成重组细胞Ⅲ，特点能无限增殖，又能产生特定抗体．

解答 解：（1）动物细胞融合技术最重要的用途就是制备单克隆抗体，常用聚乙二醇、灭活的病毒、电激等诱导因素诱导细胞融合．再经多次筛选和细胞培养获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞．
（2）①取特定抗原刺激的B淋巴细胞的细胞核，移植到去核的骨髓瘤细胞中，因为骨髓瘤细胞的细胞质中有无限增殖调控基因（prG），构成重组细胞．
②将重组细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，以获得大量单克隆抗体．
（3）①图中酶A是限制性核酸内切酶，酶B是DNA连接酶．
②图中Ⅰ表示目的基因（无限增殖调控基因或prG），对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是检测目的基因是否导入和是否表达，具有的特点是既能无限增殖，又能产生特定抗体．
故答案为：
（1）动物细胞融合　灭活的病毒　 杂交瘤
（2）①特定抗原刺激的B淋巴　无限增殖　
②体外　腹腔
（3）①限制性核酸内切酶　DNA连接酶　
②目的基因（无限增殖调控基因或prG）    检测目的基因是否导入和是否表达　  既能无限增殖，又能产生特定抗体

点评 本题考查单克隆抗体的制备、核移植、基因工程等相关知识，意在考查学生的识记、理解能力，属于中档题，解题的关键是获得重组细胞，特点是既能大量增殖，又能产生特异性抗体．