Question

6．牛奶是微生物生长的良好培养基，未经消毒处理的牛奶中往往存在多种细菌，有些细菌可引起相关疾病，如具有高度耐盐性的金黄色葡萄球菌引起人类肺炎、肠炎等疾病．因此，牛奶在饮用前需对其进行消毒，并对消毒后的牛奶中的细菌进行检测，图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程．请回答下列问题：

（1）对于生鲜牛奶可用巴氏消毒法进行消毒，使用这种方法的好处是牛奶的营养成分不被破坏．图中7.5% NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括碳源、氮源、水和无机盐．
（2）为检测消毒前后牛奶中细菌含量的变化情况，用无菌吸管从盛牛奶的锥形瓶中吸取1mL生鲜牛奶至盛有9mL无菌水的试管中，混合均匀，如此再重复3次．取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落．若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分別为35、33、34，则上述稀释倍数合适 （填“合适”或“不合适”），运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小（填“偏大”或“偏小”）．消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死，若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量，则在操作步骤上应做什么改动？稀释次数减少．
（3）金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）土生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色．图示操作中在血平板上的接种方法是平板划线法．经多次规范操作、重复实验，血平板上菌落周围均出现，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善．完善的具体方案是设罝不加鲜牛奶（接种无菌水），其他換作均相同的对照组．

Answer 1

分析 灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，适用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等．消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，适用对象主要有操作空间、某些液体、双手等．稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数．

解答 解：（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法．巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分钟或80℃煮15分钟，使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是牛奶的营养成分不被破坏．培养基的基本成分包括碳源、氮源、水和无机盐．
（2）为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，因此上述稀释倍数合适，由于经此方法接种培养时当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算，所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小．消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死，若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量，则在操作步骤上应稀释次数减少．
（3）分析图解可知，图示操作中在血平板上用接种环接种方法为平板划线法．经多次规范操作、重复实验，血平板上菌落周围均出现透明圈，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善．完善的具体方案是设罝不加鲜牛奶（接种无菌水），其他換作均相同的对照组．
故答案为：
（1）牛奶的营养成分不被破坏    碳源、氮源、水和无机盐
（2）合适      偏小   稀释次数减少
（3）平板划线法   透明圈   设罝不加鲜牛奶（接种无菌水），其他換作均相同的对照组

点评 本题主要考查微生物的培养的相关知识，关键是要求学生弄清灭菌与消毒的概念、方法、适用对象和微生物的接种与计数．