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    【题目】PD-1与PD-L1是目前肿瘤治疗的热门靶点蛋白。sPD-1是PD-1的可溶形式，能够被分泌至胞外。为探讨sPD-1对肿瘤疫苗抗乳腺癌作用的影响，科研人员进行了相关研究。

    （1）因为癌细胞具有____________等特征，癌症的治疗非常困难。肿瘤疫苗是新型治疗方法，其原理是将肿瘤抗原导入人体内，激活患者自身的免疫应答，从而达到控制或清除肿瘤的目的，下列可做为肿瘤抗原的是____________（填写序号）。

    ①衰老肿瘤细胞②肿瘤相关蛋白或多肽③含有肿瘤抗原基因的表达载体④肿瘤细胞内的脱氧核糖

    （2）研究发现，肿瘤疫苗可激活T细胞并诱导其产生IFN-γ（一种淋巴因子）。用不同浓度的IFN-γ培养小鼠乳腺癌细胞，并对其细胞膜上PD-L1表达情况进行检测，结果如图1：

    与对照组相比，实验组小鼠乳腺癌细胞膜蛋白PD-L1表达____________。

    （3）进一步研究发现，在正常机体中，组织细胞表面的PD-L1与T细胞表面的PD-1结合（如图2），使T细胞活性被适当抑制，避免了免疫过强而导致自身免疫性疾病的发生。肿瘤细胞PD-L1的高水平表达会____________（填“降低”或“增加”）肿瘤细胞被免疫系统清除的可能性。研究发现使用肿瘤疫苗时随着时间的延长而作用效果减弱，根据（2）和（3）推测可能的原因是____________，从而抑制了T细胞对肿瘤细胞的清除作用。

    （4）为了解决这一问题，科研人员对作为肿瘤疫苗的衰老癌细胞疫苗进行了基因改造，使其可以大量分泌可与PD-L1结合的sPD-1，并进行了如下实验：实验小鼠皮下接种小鼠乳腺癌细胞，随机分为三组，分别给予衰老癌细胞疫苗、高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗、磷酸缓冲液（对照）处理，分别于6、12、18、24、30天记录并统计无瘤小鼠的比例，结果如图3所示。综合上述实验分析，解释高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗组无瘤小鼠比例最高的可能机理____________。

    【答案】无限增殖、易扩散转移 ①②③ 增强 降低 肿瘤疫苗可激活T细胞并诱导其产生IFN-γ，IFN-γ促进肿瘤细胞 PD-L1表达上调 高表达sPD-1的衰老肿瘤疫苗通过分泌 sPD-1阻断PD-1与肿瘤细胞表面的PD-L1的结合，能更有效地杀死乳腺癌细胞

    【解析】

    癌细胞在适宜条件下能不受控制地无限增殖，且容易扩散转移，癌症的治疗非常困难，现代医学上尝试多种方法治疗癌症，题中涉及到癌症治疗的相关研究。图1中随IFN-γ浓度增大，细胞膜上PD-L1表达量增加；图2中涉及T细胞特异性识别抗原；图3可知高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗处理的皮下接种小鼠乳腺癌细胞的实验小鼠患癌率最低，且肿瘤疫苗随着时间的延长而作用效果减弱。

    （1）因为癌细胞具有无限增殖、易扩散转移等特征，癌症的治疗非常困难。肿瘤疫苗需要有肿瘤细胞上抗原结构，且侵染性较低，可做为肿瘤抗原的是①衰老肿瘤细胞②肿瘤相关蛋白或多肽③含有肿瘤抗原基因的表达载体。

    （2）根据曲线图分析可知，与对照组相比，实验组小鼠乳腺癌细胞膜蛋白PD-L1表达增强。

    （3）由“在正常机体中，组织细胞表面的PD-L1与T细胞表面的PD-1结合（如图2），使T细胞活性被适当抑制，避免了免疫过强而导致自身免疫性疾病的发生”可知：细胞表面的PD-L1可以会抑制T细胞活性，故肿瘤细胞PD-L1的高水平表达会降低肿瘤细胞被免疫系统清除的可能性。研究发现使用肿瘤疫苗时随着时间的延长而作用效果减弱，根据（2）“随IFN-γ浓度增大，细胞膜上PD-L1表达量增加”和（3）“细胞表面的PD-L1可以会抑制T细胞活性”推测可能的原因是肿瘤疫苗可激活T细胞并诱导其产生IFN-γ，IFN-γ促进肿瘤细胞 PD-L1表达上调，从而抑制了T细胞对肿瘤细胞的清除作用。

    （4）根据以上分析及实验结果，可推测高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗组无瘤小鼠比例最高的可能原因是高表达sPD-1的衰老肿瘤疫苗通过分泌 sPD-1阻断PD-1与肿瘤细胞表面的PD-L1的结合，能更有效地杀死乳腺癌细胞。

    练习册系列答案
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    【题目】乙型肝炎病毒（HBV）可引发慢性肝炎、肝硬化等疾病，乙型肝炎病毒调节蛋白HBx对HBV复制有重要作用。图1表示在PCR过程中HBx基因与引物的关系，图2表示利用中国仓鼠生产乙肝病毒HBx蛋白流程图。回答下列问题：

    （1）利用PCR技术扩增图1中HBx基因时，在第______次循环结束后即可出现两条链等长的目的基因片段。图2中②过程需要用到限制酶和DNA连接酶，两种酶作用的化学键______（填“相同”或“不相同”）。

    （2）基因表达载体导入受精卵常用______法，检测HBx基因是否转录出mRNA时，需要用______做探针，再与相应的物质杂交。

    （3）④过程体外受精前需要对精子进行______处理，卵母细胞需要发育到______期，才具备与精子受精的能力。⑤过程将获得的早期胚胎移植到经过______处理的受体仓鼠子宫内。

    （4）在⑤步聚操作前对胚胎进行了检查和筛选，发现有些胚胎因为外源基因的插入而死亡外源基因插入导致胚胎死亡的原因可能是______。

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    【题目】欲验证胰岛素的生理作用，根据以下提供的实验材料与用具，提出实验思路，预测实验结果并进行分析。

    材料与用具：小鼠若干只，胰岛素溶液，葡萄糖溶液，生理盐水，注射器等。

    （要求与说明：血糖浓度的具体测定方法及过程不作要求，实验条件适宜）

    （1）实验思路：

    ①_______

    （2）预测实验结果（设计一个坐标，用柱形图表示至少3次的检测结果）_______：

    （3）分析与讨论

    ①正常人尿液中检测不到葡萄糖，其原因是______。

    ②当机体血糖水平升高时，胰岛中的内分泌细胞及其分泌的激素变化是______。此时，机体细胞一方面增加对葡萄糖的摄取、贮存和利用，另一方面______。

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    【题目】下图甲表示某动物的一个正在合成和分泌消化酶的胰腺细胞，数字代表细胞结构，请分析回答 下列问题。

    （1）据图可知，以下细胞结构①是_____、②是_____、③是_________、④是_____。

    （2）消化酶经过细胞膜分泌到细胞外的方式是______，该过程的进行依赖细胞膜的_________。

    （3）在消化酶的合成和分泌过程中，经过的细胞结构依次为_____(用箭头和图中数字表示)，在这一 过程中由[ ]_____提供能量。

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    A. A叶片来自树冠的下层

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    C. 若要比较A、B两种新鲜叶片中叶绿素的含量，可用95%乙醇和无水碳酸钠提取色素

    D. 当A、B叶片在某光照强度下制造的有机物相同时，则净光合速率也相同，

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    （5）甲细胞的DNA主要存在于_______________（填名称）中。

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    （3）取适量后肠样液涂布到加入______________染料的含有纤维素的培养基上，等培养基上长出菌落后，选择周围有明显______________的菌落进一步研究。

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    A. 该研究是通过抑制基因B的转录来提高产油率

    B. 基因B的链1与mRNA具有相同的碱基序列

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    D. 基因A和基因B位置的互换属于染色体变异

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