Question

8．研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物．请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题：
（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C₁酶、C_X酶、葡萄糖苷酶．
（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线法进行接种，此过程所用的接种工具是接种环，操作时采用灼烧灭菌的方法．
（3）刚果红可以与纤维素等多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红．第一种 （填“第一种”或“第二种”）方法会使菌落之间发生混杂．
（4）如果观察到产生透明圈的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌．为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验．
（5）如图为实验室培养和纯化菌种过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是C

A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
B．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理
C．步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖
D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养．

Answer 1

分析 纤维素分解菌可以产生纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶．金属接种工具常用灼烧灭菌．刚果红染液与纤维素呈红色，纤维素分解菌在含有刚果红染液的培养基中形成的菌落会出现透明圈，可以用来鉴别纤维素分解菌．

解答 解：（1）纤维素酶是一种复合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶．
（2）分离和纯化微生物常用的接种方法是平板划线法，常用的接种工具是接种环，操作时采用灼烧的方法灭菌．
（3）刚果红不与纤维二糖和葡萄糖发生反应，第一种方法进入刚果红后会使菌落之间发生混杂，第二种方法在倒平板时进入刚果红．
（4）刚果红与纤维素反应呈红色，纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色，在菌落周围会出现透明圈．为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验．纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定．
（5）A、①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确；
B、每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落，B正确；
C、倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，C错误；
D、划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D正确．
故选：C．
故答案为：
（1）C₁酶、C_X酶、葡萄糖苷酶
（2）平板划线法    灼烧
（3）纤维二糖　  倒平板　 　 第一种
（4）透明圈
（5）C

点评 本题主要考查纤维素分解菌的鉴别，意在强化学生对纤维素分解菌的筛选与分离实验的操作理解，提高实验技能．