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    【题目】牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况，也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毐，以杀死有害微生物。为检测消毐前后牛奶中细菌含量的变化情况,有人做了如下图所示的实验。请回答下列有关问题：

    （1）微生物培养操作过程中，玻璃器皿和金属用具等可以放入 内,在160-170℃加热1-2 h可达到灭菌的目的。例平板时，需要等待平板冷却后,将平板 放置。

    （2）微生物接种的方法,最常用的是 和稀释涂布平板法,后者是将菌液进行一系列的 然后将各组菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。

    （3）从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养菌中加入 ，培养后菌落呈现 色的可以认定为大肠杆菌。

    （4）若上图所示操作涂布了 3个培养皿,菌落数分别为40个、41个、39个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为 个。运用这种方法统计的结果往往较实际值 （填“偏大”成“偏小”）,原因是 。

    【答案】（1）干热灭菌箱 倒过来（倒置）

    （2）平板划线法 梯度稀释

    （3）伊红美蓝 黑

    （4）4×106 偏小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上现察到的只是一个菌落

    【解析】

    试题分析：（1）实验过程中，玻璃器皿和金属用具能耐高温，且要保持干燥，因此这些器具可以采用干热灭菌法来灭菌。倒平板后冷却需要倒过来放置，防止皿盖上的水珠滴落到培养基上。

    （2）微生物最常用接种的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,其中稀释涂布平板法接种前需要将菌液进行梯度稀释，经涂布平板接种后进行稀释培养。

    （3）检测大肠杆菌的方法是在培养基中加人伊红美蓝，菌落具有（金属光泽的紫）黑色特征的可以认定为大肠杆菌。

    （4）稀释后牛奶中每毫升含细菌数为（40+41+39）÷3=40个，所以稀释前每毫升中的细菌数为4×106．由于经此方法接种培养时当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算，所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。

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