Question

5．甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和致畸作用，利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点．图甲为采集活性污泥作为优良菌源，通过筛选分离出能以甲醛为唯一碳源的高效降解菌的实验过程．请分析回答下列问题：

（1）上述实验材料中，不需要进行灭菌处理的是活性污泥，培养基灭菌的常用方法为高压蒸汽灭菌．该实验③过程所用的选择培养基只能以甲醛作为唯一碳源，其原因是甲醛能够提供碳源、抑制其他微生物的生长．
（2）由③一④的分离活性污泥中细菌的接种方法（如图乙）为平板划线法法，接种时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，这样做的目的是将聚集的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落．
（3）图乙表示在平板培养基上的第一次和第二次划线，请在图乙中画出第三次划线．

（4）为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响，进行了相应实验．当甲醛的初始浓度小于1200mg/L时，菌株可以完全降解甲醛；当甲醛的初始浓度增高至1 600mg/L时，48h后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是甲醛浓度过高会使菌体蛋白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力（或甲醛浓度过高会产生毒害作用，降低了细菌降解甲醛的能力）．
为了使该实验所得结果准确可靠，还应该设置不接种甲醛降解菌的对照实验，以排除甲醛自然挥发对实验结果的干扰．

Answer 1

分析 在分离和纯化分解甲醛的细菌的过程中，通过①过称制取各种菌的悬浊液，此过程中的活性污泥不需要灭菌操作，②过程可以获得各种微生物，③中的培养基中的碳源只含有甲醛，只有可以分解甲醛的细菌能够存活，所以通过③过程可以筛选出能分解甲醛的微生物，④过程可以获得单菌落，获得单菌落过程中常用的接种方法是平板划线法或者稀释涂布平板法；甲醛能使蛋白质变性，过高的甲醛浓度可以使分解甲醛的菌体白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力．

解答 解：（1）在微生物的培养过程中应该进行无菌操作，由于该实验是从活性污泥中分离菌种，因此对于活性污泥不能灭菌，培养基灭菌的常用方法为高压蒸汽灭菌法．③过程的培养基是无机固体培养基上加入甲醛，甲醛是该培养基的唯一碳源，甲醛的作用是为能分解甲醛的微生物提供碳源，同时甲醛能抑制其他微生物的生长．
（2）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是；将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落．
（3）第三次划线应该从第二次划线的末端开始，并且不与第一次划线接触，答案如图：

（4）甲醛能使蛋白质变性，过高的甲醛浓度可以使分解甲醛的菌体白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力，因此如甲醛浓度过高，菌株对甲醛的能力降低；甲醛具有挥发性，甲醛挥发会对实验结果造成影响，为了使该实验所得结果准确可靠，还应该设置不接种甲醛降解菌的对照实验，以排除甲醛自然挥发对实验结果的干扰．
故答案为：
（1）活性污泥     高压蒸汽灭菌    甲醛能够提供碳源、抑制其他微生物的生长
（2）平板划线法    灼烧     将聚集的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落
（3）

（4）甲醛浓度过高会使菌体蛋白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力（或甲醛浓度过高会产生毒害作用，降低了细菌降解甲醛的能力）          不接种甲醛降解菌

点评 本题主要考查了微生物的分离与培养和微生物的接种方法，意在强化学生对实验室的微生物的培养的相关知识的理解与掌握．