Question

酵母菌生长的最适宜温度在20℃～30℃之间，能在pH为3～7.5的范围内生长，在氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖，大约每1.5～2 h增殖一代。某研究性学习小组据此探究酵母菌种群在不同的培养液浓度和温度条件下种群密度的动态变化，进行了如下实验，实验操作步骤如下：

第一步：配制无菌马铃薯葡萄糖培养液，活化酵母菌液。

第二步：利用相同的多套装置，按下表步骤操作。

装置编号		A	B	C	D
装置容器 内的溶液	无菌马铃薯葡萄糖 培养液/mL	10	10	5	5
	无菌水/mL	－	－	5	5
	活化酵母菌液/mL	0.1	0.1	0.1	0.1
温度(℃)		5	25	5	25

 

 

 

第三步：用血球计数板计数装置中起始的酵母菌数目，做好记录。

第四步：将各装置放在条件相同且适宜的条件下培养。

第五步：连续7天，每天随机抽时间取样计数，做好记录。

回答下列问题：

(1)改正实验操作步骤中的一处错误_______________________________。

(2)某同学第5天在使用血球计数板计数时的做法如下：

①振荡摇匀试管中的培养液，取1 mL并适当稀释(稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液)。

②先将________放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液________，制作好临时装片。

③显微镜下观察计数：在观察计数时只计算________(被、不被)染成蓝色的酵母菌。

(3)如所使用的血球计数板有16个中方格，每1中方格中有25个小方格，每1个小方格的容积为0.1 mm³(1 mL＝1000 mm³)。请推导出1 mL培养液中酵母菌细胞的计算公式：酵母细胞个数/mL＝________。

 

Answer 1

(1)第五步中应每天同一时间(定时)取样

(2)②盖玻片　用滤纸(吸水纸)吸去　③不被

(3)平均每个小方格的酵母菌数×400×10⁴×稀释倍数