Question

【题目】科学工作者欲培育能产生含铁量较高的转基因花生新品种，Ti质粒中含有潮霉素抗性基因，具体步骤如图：

（1）完整的Ti质粒除了图示结构外，还应该包括启动子、终止子等，其中启动子位于基因的首段，它的作用是_____________________________________________________________________。

（2）若铁结合蛋白基因来自菜豆，获取该目的基因需要用到的工具酶的特点是_______________________________________________________________________________________。

（3）图中将目的基因（铁结合蛋白基因）导入受体细胞的方法为______________；为确定转基因花生是否培育成功，首先应检测___________，这是目的基因能否在受体细胞内稳定遗传的关键；其次，利用___________检测目的基因是否转录出相应的mRNA；最后，利用抗原—抗体杂交法检测目的基因是否翻译成蛋白质。

（4）图中用到的植物细胞工程技术是_______________________________，培养基1中经过脱分化得到愈伤组织，培养基2中筛选的方法是在培养基中加入一定量的_________________，培养基3的作用是______________________________。

Answer 1

【答案】RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录 能识别双链DNA分子的某种特定的脱氧核苷酸序列并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 农杆菌转化法 转基因花生的DNA上是否插入目的基因 分子杂交法 植物组织培养 潮霉素 诱导愈伤组织再分化

【解析】

据图分析，重组Ti质粒中铁结合蛋白基因称为目的基因，潮霉素抗性基因为标记基因；将重组Ti质粒导入受体细胞的方法是农杆菌转化法；将开花后未成熟的胚进行植物组织培养，脱分化形成愈伤组织，作为受体细胞，最终培育形成转基因花生，过程中需要生长素和细胞分裂素进行调节。

基因工程的一般操作步骤有：目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达。获取目的基因的方法有三种：①从基因文库中获取②利用PCR技术扩增③人工合成（化学合成）。

（1）启动子位于基因的首段，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录。

（2）若铁结合蛋白基因来自菜豆，获取该目的基因需要用到的工具酶是限制酶，限制酶能识别双链DNA分子的某种特定的脱氧核苷酸序列并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

（3）图中将目的基因（铁结合蛋白基因）导入受体细胞的方法为农杆菌转化法；为确定转基因花生是否培育成功，首先应检测转基因花生的DNA上是否插入目的基因；其次，利用分子杂交法检测目的基因是否转录出相应的mRNA；最后，利用抗原—抗体杂交法检测目的基因是否翻译成蛋白质。

（4）图中用到的植物细胞工程技术是植物组织培养；培养基1中经过脱分化得到愈伤组织，培养基2中筛选的方法是在培养基中加入一定量的潮霉素，培养基3的作用是诱导愈伤组织再分化。