科目:高中生物 来源:2012届广东省汕头市高二下学期期中考试生物试卷 题型:选择题
Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的广泛运用成为可能,这是因为
A.Taq DNA 聚合酶能使扩增反应在 DNA 变性条件下进行
B.Taq DNA 聚合酶催化下的扩增反应不需要引物
C.Taq DNA 聚合酶使扩增反应不需要ATP
D.Taq DNA 聚合酶能使扩增反应具有连续性
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科目:高中生物 来源: 题型:阅读理解
Taq DNA聚合酶是从一种嗜热细菌中分离提取的,该菌是1966年从美国黄石国家森林公园的一个热泉中发现的。实验表明,PCR反应时变性温度为95 ℃,50个循环后,Taq DNA聚合酶仍有65%的活性。Taq DNA聚合酶的热稳定性是该酶用于PCR的前提条件,也是PCR技术能迅速发展和广泛应用的原因。Taq DNA聚合酶还具有逆转灵活性,其作用类似于逆转录酶。Taq DNA聚合酶表现为Mg2+依赖,该酶的催化活性对Mg 2+浓度非常敏感。测定结果为MgCl2浓度在2.0 mmol/L时该酶催化活性最高,此浓度能最大限度地激活Taq DNA聚合酶的活性,Mg2+过高就抑制酶活性,因而MgCl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整,优化浓度。Taq DNA聚合酶具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性,而无3′→5′外切酶活性,它不具有校对活性。因而在PCR中如发生某些碱基的错配,该酶是没有校正功能的。Taq DNA聚合酶的碱基错配几率为2.1×10-4。
(1)Taq DNA聚合酶在高温下仍保持活性,因此在PCR扩增时可以________加入,________(填“需要”或“不需要”)再添加。
(2)影响PCR反应的影响因素除引物、反应温度、时间和TaqDNA聚合酶浓度外,从材料中可知,还应有________。
(3)这种嗜热细菌能够在热泉中生存,这是________的结果。
(4)PCR中由碱基错配引起的变异属于________。假设对一个DNA进行扩增,第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配,则扩增若干次后检测所有DNA的扩增片段,与原DNA相应片段相同的占________。
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PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,而被广泛应用,此过程需要一种Taq DNA聚合酶?
请回答有关问题:
(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用__________________?
(2)TaqDNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的?
①为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢?
____________________________
②TaqDNA聚合酶的功能是____________________________?
③TaqDNA聚合酶的化学本质为蛋白质,可用________法和________法进行分离?
(3)从土壤中分离分解尿素的细菌时,应采取的措施是_______________,原因是__________________________________?
(4)相对于细菌分离,而DNA分子的分离和提取操作要复杂的多?
①在DNA提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是:______________________?________________________?
②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料?为什么?
______________ , ______?
(5)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在________中才能进行,并且要严格控制________条件?
(6)PCR中加入的引物有________种,加入引物的作用是________________?
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科目:高中生物 来源: 题型:
(2012·南京模拟)酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛地应用于各个领域,下列有关叙述错误的是 ( )
A.90℃高温会使Taq DNA聚合酶失去催化活性
B.制备固定化酶的方法主要有包埋法、交联法和吸附法等
C.固定化酶在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性
D.固定化细胞可以催化一系列酶促反应
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