[题目]基因工程中,需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已知限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-,根据图示判断下列叙述错误的是( )A. 用限制性核酸内切酶切割获得目的基因时,有四个磷酸二酯键被水解B. 质粒用限制性核酸内切酶Ⅰ切割,目的基因用限制性核酸内切酶Ⅱ切割C. 限制性� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】基因工程中,需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—,根据图示判断下列叙述错误的是(　　)

A. 用限制性核酸内切酶切割获得目的基因时,有四个磷酸二酯键被水解

B. 质粒用限制性核酸内切酶Ⅰ切割,目的基因用限制性核酸内切酶Ⅱ切割

C. 限制性核酸内切酶Ⅰ和限制性核酸内切酶Ⅱ切割后获得的黏性末端相同

D. 质粒中的标记基因便于筛选出目的基因已经表达的细胞

【答案】D

【解析】

由于限制酶Ⅱ能识别限制酶Ⅰ的识别序列，限制酶Ⅰ不能识别限制酶Ⅱ的识别序列；要将目的基因从该DNA链中提取出来，需要在目的基因左右切开，所以要用限制酶Ⅱ；质粒不能用限制酶Ⅱ，如果用该酶的话，质粒就会有两个切口。

A、用限制性核酸内切酶Ⅱ，将目的基因左右切开切割，又由于DNA是双链，故需要有四个磷酸二酯键被水解，A正确；

B、通过分析可知，质粒用限制性核酸内切酶Ⅰ切割，目的基因用限制性核酸内切酶Ⅱ切割，B正确；

C、根据题意可知二者产生的粘性末端相同，都是，C正确；

D、质粒中的标记基因的作用是用来筛选含有目的基因的受体细胞，D错误。

故选D。

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【题目】某科研小组为研究温度变化对某栽培植物生长的影响，在光照、CO2浓度及其他外界条件适宜且恒定的条件下，测得植物叶肉细胞净光合速率及在黑暗条件下呼吸速率的相对值如表；在不同温度下该植物叶肉细胞间的CO2浓度相对值如图。请分析回答：

温度（℃）	20	25	30	35	40	45	50	55
净光合速率相对值	2	4	5	3	0	-4	-3	-2
呼吸速率相对值	2	3	3.5	4.5	5	4.5	3	2

（1）在40℃条件下，该植物叶肉细胞的胞间CO2浓度应处在图中的______点，判断依据是______。

（2）图中d点时，叶肉细胞所处的温度是______℃。

（3）若题中数据为某植物密闭容器中所测得的数量变化，每天交替进行12h光照、12h黑暗，该植物能长期正常生长的温度为______。理由是______。

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【题目】水稻是世界上最重要的粮食作物之一，是全球约半数人口的主粮。然而水稻只有在磷营养充足的条件下才能保证高产。S基因是番茄线粒体中的磷转运蛋白基因，科研人员将S基因转入水稻体内，以期望获得低磷条件下的高产水稻。操作流程如下：

（1）磷是构成____等物质的重要组成元素。土壤溶液中的磷浓度一般不超过2×10-12 mol/L，而植物细胞内的磷浓度却大于10×10-4 mol/L，因此植物从土壤中吸收磷的方式是____。

（2）提取番茄细胞的总RNA经过____得到的cDNA，用限制酶处理后与载体结合并转入受体菌体内，建立番茄的_____，从中获取S基因。但此途径得到的S基因两端没有限制酶识别序列，利用____技术添加相应序列并扩增。已知Ti质粒转录方向为顺时针，相关酶切位点如下表。

通过测序已知S基因部分序列如下：

请补充扩增结束后，大多数DNA片段的碱基对序列____________ 。

（3）构建含S基因的表达载体时，通常用两种限制酶切割含S基因的DNA片段和Ti质粒，限制酶作用部位为____（填化学键名称）。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用____处理农杆菌，使得表达载体易于导入。为了使S基因能够正确表达，还应插入的元件是什么_________（请在下图中画出并标注元件名称）。

（4）将表达载体导入农杆菌以及农杆菌与水稻愈伤组织共培养时需要进行筛选，这两步骤的培养基中都需要加入____，以筛选出成功导入表达载体的农杆菌和水稻愈伤组织。

（5）GUS基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。经无色物质K处理愈伤组织并筛选出了呈现蓝色的组织，说明____。

（6）农杆菌Ti质粒上的____序列，可以从农杆菌中转移并随机插入到被侵染植物细胞的____中。随机挑选三个转基因株系甲、乙、丙进行阳性检测试验。分别提取每个样品的基因组，利用限制酶进行酶切电泳验证，结果如下图所示，

甲、乙、丙转基因植株中分别被转入了____个S基因。

（7）通过盆栽转基因株系，分别在低磷条件下和磷正常条件下测定____以验证转入S基因是否能达到目的。测定结果如下图。

结果显示____，从而说明低磷条件下，S基因可以调控转基因水稻对磷的吸收与积累，提高转基因水稻产量。

（8）本实验的研究价值在于____。

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【题目】研究表明，机体性腺的内分泌机能受下丘脑-垂体-性腺轴调控，如图所示，①②③代表激素，Ⅰ、Ⅱ代表作用过程。请回答以下问题：

(1)图中③的分泌存在着____________调节；图中③几乎可作用于体内的一切组织细胞，这说明___________________________________。

(2)卵巢产生的雌激素能促进雌性动物卵细胞的形成和排卵。但在生产实践中，为促进雌性动物多排卵，通常使用的并不是雌激素，结合上图分析可能的原因：大量使用雌激素会使过程Ⅰ、Ⅱ_________（填“增强”或“减弱”），通过影响激素②______________（填名称）的分泌量，从而导致性腺_____________________。

(3)下丘脑和垂体之间存在神经联系和体液联系，为了证明下丘脑调节垂体分泌激素②的方式是体液调节而不是神经调节，可利用小白鼠做实验，实验组所做的处理是：______________，一段时间后，检测小白鼠血液中激素②的含量，发现其含量没有减少。

(4)若该腺体发生癌变，致癌病毒的某种蛋白质处理后作为______（填“抗原”或“抗体”）注入癌症早期患者体内，刺激T细胞增殖分化为_______，从而增强患者免疫系统的监控、清除能力，达到治疗效果。

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