Question

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有Pst I、Sma I、Hind Ⅲ、Alu I等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图回答：

（1）在构建基因表达载体时，为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶_____________分别对________________进行切割，切割后产生的DNA片段分别为_____和_________种。

（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体I中含有__________作为标记基因。

（3）通常采用__________________技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。

（4）利用组织培养技术特含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的______________________________过程。

Answer 1