Question

20．有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境．研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物分解．分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示．

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、无机盐和氮源四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是只有能降解利用苯磺隆的菌株才能生存繁殖成菌落．
（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和细胞分裂素，这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用．
（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环（或接种针）．划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落．造成划线无菌落可能的操作失误有接种环在二区划线前未冷却；划线未从第一区域末端开始．
（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液作图乙所示实验．该实验的假设是
目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质，该实验设计是否合理？为什么？不合理，缺少空白对照．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：图示是探索苯磺隆降解机制的实验过程，图甲中，首先用选择培养基从土壤中筛选出菌种，再采用平板划线法纯化出相应的菌种；图乙中：通过测定苯磺隆的浓度测定其降解率．据此答题．

解答 解：（1）微生物的各种培养基配方一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养；选择培养基只允许特定种类的微生物生长，又要抑制或阻止其他种类微生物生长，因而必须以苯磺隆为唯一碳源只让目的菌株生存繁殖．
（2）植物组培过程中启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素是生长素和细胞分裂素；为了避免每次配制时都要称量，可将激素类先配成母液．
（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环（或接种针）；接种环在平板内的每一次划线前，都要先灼烧灭菌冷却后划线，而且要从上一次划线末端而非空白处划线，不冷却会烫死上次划线末端菌株，从空白处划线是不会有菌株的．
（4）从图乙上清液中加入蛋白酶溶液可知是用于水解上清液中的某蛋白质的，由此可判定实验假设是目的菌株通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆，但是尚需设置不加入蛋白酶的对照组实验，否则没有说服力，因而不合理．
（5）获得的菌株若想长期保存，方法是甘油管藏法．
故答案为：
（1）无机盐和氮源   只有能降解利用苯磺隆的菌株才能生存繁殖成菌落
（2）细胞分裂素    母液
（3）接种环（或接种针）   接种环在二区划线前未冷却；划线未从第一区域末端开始
（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质   不合理，缺少空白对照

点评 本题结合探究实验过程，考查微生物的培养和分离、探究实验等知识，要求考生识记培养基的成分、种类及作用；掌握分离微生物常用的两种方法及操作过程；掌握探究实验的原则，能结合图中信息知识答题．