Question

【题目】动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础，在动物细胞工程的其他技术中都得广泛应用（如图）．下面是与动物细胞工程相关的问题，请分析回答：
（1）在进行动物细胞培养时，首先要将动物组织剪碎，然后用处理，以分散成单个细胞，制成细胞悬液．
（2）动物细胞培养时，要保证细胞必需的营养、适宜的温度和pH条件，还要提供无菌、无毒和适宜的气体环境．为达到无菌、无毒的环境条件，除了要对培养液和培养器具进行消毒外，还要① ， ② ． 气体环境中CO2的作用是 ．
（3）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是 ．
（4）如图表示单克隆抗体的制备过程，给小鼠注射特定抗原后产生的、与骨髓瘤细胞融合的细胞是 ． 在细胞融合的过程中，常用的化学诱导剂是；筛选出的杂交瘤细胞所表现出的优良性状是 ．

Answer 1

【答案】
（1）胰蛋白酶（胶原蛋白酶）
（2）在培养液中加入一定量的抗生素；定期更换培养液；维持培养液的PH
（3）10代以后的细胞遗传物质可能发生改变（或保证供体细胞正常的遗传基础）
（4）B淋巴细胞（浆细胞）；聚乙二醇（PEG）；可在体外条件下，无限增殖，又能分泌单一抗体
【解析】解：（1）在进行动物细胞培养时，动物组织需要用胰蛋白酶（胶原蛋白酶）处理分散成单个细胞，制成细胞悬液．（2）动物细胞培养时，要保证无菌、无毒的环境条件，可采用对培养液和培养器具进行消毒、在培养液中加入一定量的抗生素、定期更换培养液．气体环境中CO2的作用是维持培养液的PH．（3）10代以后的细胞遗传物质可能发生改变（或保证供体细胞正常的遗传基础），因此在核移植技术中供体细胞一般选用传代10代以内的细胞．（4）在单克隆抗体的制备过程中，给小鼠注射特定抗原后，产生的具有免疫能力的B淋巴细胞（浆细胞），常用的化学诱导剂是聚乙二醇（PEG）诱导具有免疫能力的B淋巴细胞（浆细胞）与骨髓瘤细胞融合．筛选出的杂交瘤细胞具有在体外条件下无限增殖，又能分泌单一抗体的优良性状． 所以答案是：（1）胰蛋白酶（胶原蛋白酶）（2）①在培养液中加入一定量的抗生素　②定期更换培养液、维持培养液的PH（3）10代以后的细胞遗传物质可能发生改变（或保证供体细胞正常的遗传基础）（4）B淋巴细胞（浆细胞）　聚乙二醇（PEG）可在体外条件下，无限增殖，又能分泌单一抗体
【考点精析】关于本题考查的动物细胞与组织培养过程和单克隆抗体的制备，需要了解取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养；对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞；然后对它进行克隆化培养和抗体检测；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体才能得出正确答案．