Question

19．蓝莓提取物中的花青素不仅易于吸收，而且它们可以穿过血液/脑屏障，保护各个精细组织的细胞，并能有效抑制破坏眼部细胞的酵素，从而改善视力．蓝莓中花青素获得途径如图

（1）图中①和②分别表示蓝莓组织培养中的脱分化和再分化过程．如果要用此方法对蓝莓进行大规模种植，在对蓝莓外植体进行接种前，需要进行配制MS培养基、外植体消毒两项工作．
（2）花青素易溶于甲醇、乙酮、丙酮等溶剂中，所以采用萃取法进行提取．新鲜的蓝莓含有大量的水分，在花青素的提取过程中，要对新鲜的蓝莓进行干燥（脱水）处理．
（3）提取血液中的血红蛋白时，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，洗涤红细胞时要用生理盐水（填溶液）反复洗涤、离心．要让红细胞破裂，释放血红蛋白．得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，即血红蛋白的粗分离，目的是除去去除样品中相对分子质量较小的杂质．然后通过凝胶色谱法（填方法）将样品进一步纯化，最后进行纯度鉴定．

Answer 1

分析 1、分析题图：本题是通过两种方式获取花青素：1是植物组织培养蓝莓外植体到植株阶段，从果实中提取花青素，2是植物组织培养蓝莓外植体到愈伤组织阶段，从愈伤组织分离的单细胞中获得高产细胞系，从细胞产物中提取花青素．3、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度；④充足的养料．植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化．消毒和灭菌：外植体可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培养基需用高压蒸汽灭菌．
2、血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白．（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析．（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳．

解答 解：（1）图中①和②分别表示蓝莓组织培养中的脱分化和再分化，植物组织培养时，离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配置适宜的培养基，常用的一种培养基是MS培养基，用于植物组织培养的培养基同样适合某些微生物的生长，因此在对蓝莓外植体进行接种前，需要进行制备MS固体培养基（配置培养基）、外植体消毒两项工作．
（2）花青素易溶于甲醇、乙醇、丙酮等混合溶剂中，所以采用萃取方法进行提取．新鲜的蓝莓含有大量的水分，在花青素的提取过程中，要对新鲜的蓝莓进行干燥处理，但要注意控制温度和时间．温度和时间温度过高时间过长会造成花青素水解．
（3）血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定．采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固．样品处理又包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析4步．洗涤红细胞时要用生理盐水反复洗涤、离心．红细胞破裂释放血红蛋白．得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白．样品的纯化是通过胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去．使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳．
故答案为：
（1）脱分化  再分化   外植体消毒  
（2）萃取  干燥（脱水） 
（3）生理盐水 去除样品中相对分子质量较小的杂质     凝胶色谱法

点评 本题主要考查植物组织培养、植物有效成分的提取、血红蛋白的提取和分离过程的相关知识，考生识记植物组织培养的过程、原理、条件，识记植物有效成分提取的方法和过程是解题的关键．