Question

6．如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线（图中B、D两点表示经筛选后继续培养），请据图回答下面的问题：
（1）OA段的培养称为原代培养，AB段可能发生了接触抑制现象，需要用胰蛋白（或胶原蛋白）酶处理，以使组织细胞分散开来．
（2）动物细胞培养过程中，为维持培养液的pH，通常在培养液中通入一定浓度的CO₂．
（3）培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到减数第二次分裂中期．
（4）目前使用的或冷冻保存的细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型．

Answer 1

分析 人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养，分瓶后的培养称为传代培养；当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即会发生接触抑制现象；细胞系指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体；从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群，称细胞株；已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系，称连续细胞系或无限细胞系，无限细胞系大多已发生异倍化，具异倍体核型．

解答 解：（1）人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养（OA），分瓶后的培养称为传代培养；当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，即会发生接触抑制现象；用胰蛋白酶可使组织细胞分散开来；
（2）肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO₂的目的是维持培养液pH．
（3）体外受精时，卵母细胞需在体外培养到减数第二次分裂中期．
（4）传代培养10代以上，细胞核型（染色体）可能会发生改变，所以核移植时一般不选CD段．
故答案为：
（1）原代             接触抑制                  胰蛋白（或胶原蛋白）
（2）CO₂          
（3）减数第二次分裂中          
（4）10

点评 本题考查细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程及条件；识记体外受精的过程；识记胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理学基础，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．