Question

请分析回答下列关于基因工程的问题：（10分）

某种大肠杆菌的质粒中含有β-半乳糖苷酶α片段序列（图4），大肠杆菌的DNA分子中则含有β-半乳糖酶ω片段序列（图3），由于天然大肠杆菌同时具备这两种片段序列，可以使培养基中含有X-gal底物转变成蓝色产物，当缺少任意一个α或ω片段序列，X-gal底物不能转变成蓝色产物。HindⅢ、 EcoRI、BamHI分别为三种限制性内切酶，下图5中箭头所指为三种限制酶的切点。

（1）要能筛选出转基因菌种，应选用的限制性内切酶是 ，选择的依据是 。

（2）控制F8的基因也可以通过人体细胞相应的mRNA来合成，该合成的过程称为 。如果F8基因表示人生长激素基因，则相应的mRNA可以从人体 （下丘脑细胞/垂体细胞/下丘脑和垂体细胞/所有体细胞）中获取。

（3）重组质粒形成与否需要鉴定和筛选，方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌，通过含抗生素的培养基进行培养，观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断，如下图。

在筛选时应该先用选择培养基 （A/B）。

（4）将经转基因技术处理过的质粒导入大肠杆菌后，再将大肠杆菌接种到含有X-gal底物的培养基培养一段时间后，培养基中出现较多的蓝色菌落，这是因为 。

（5）控制F8的基因能在大肠杆菌细胞内得到表达，其遗传学基础是 。

（6）如果控制F8的基因长度为3000碱基对(bp)，用限制性核酸内切酶酶切后进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶A单独酶切，结果如下图l。用 酶B单独酶切，结果如下图2。用酶A和酶B同时酶切，结果如下图3。请画出该基因同时用酶A和酶B酶切时的作用位点示意图（并标注好酶切后碱基片断的长度）： 。

Answer 1