Question

19．请回答利用基因工程生产人胰岛素的相关问题：
（1）先从人体胰岛β细胞中获取控制人胰岛素合成的mRNA，然后在逆转录酶催化下合成人胰岛素基因．
（2）构建重组DNA分子通常需要相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体，然后用DNA连接酶使两者连接在一起．
（3）大肠杆菌的细胞壁会阻碍重组DNA进入细胞，通常使用氯化钙处理大肠杆菌．
（4）为检测目的基因是否在大肠杆菌中高效稳定表达，最简单有效的方法是D（A．检测大肠杆菌中有无人胰岛素基因B．检测培养基中葡萄糖浓度C．检测大肠杆菌中人胰岛素基因mRNA含量D．检测培养基中胰岛素含量）．人胰岛素基因能在大肠杆菌中表达是因为人和大肠杆菌共用一套遗传密码．
（5）胰岛素除了用于治疗糖尿病之外，还可以用来提高动物细胞克隆形成率．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）胰岛素基因只在胰岛β细胞中表达，因此可从胰岛β细胞中获取控制人胰岛素合成的mRNA，然后在逆转录酶催化下合成人胰岛素基因．
（2）构建重组DNA分子通常需要相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体，然后用DNA连接酶使两者连接在一起．
（3）大肠杆菌的细胞壁阻碍会重组DNA进入细胞，通常使用氯化钙处理大肠杆菌，增大细胞壁的通透性，使之成为易于吸收周围环境中的感受态．
（4）胰岛素基因表达的产物是胰岛素，因此为检测目的基因是否在大肠杆菌中高效稳定表达，最简单有效的方法是检测培养基中胰岛素含量．人胰岛素基因能在大肠杆菌中表达是因为人和大肠杆菌共用一套遗传密码．
（5）胰岛素可以促进细胞摄取和利用葡萄糖，提高细胞活性，因此可以用来提高动物细胞克隆形成率．
故答案为：
（1）胰岛β     逆转录      
（2）相同     
（3）细胞壁
（4）D    一套遗传密码      
（5）细胞克隆

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．