Question

许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如下图。请据图回答：

（1）基因工程中，构建基因表达载体的目的是 。

（2）限制酶EcoRⅠ的识别序列和切点是—G↓AATTC—，SmaⅠ的识别序列和切点是—CCC↓GGG—。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是 ，连接过程中需要的基本工具是 。

（3）转化过程中，大肠杆菌应先用 处理，使其处于能吸收周围DNA的状态。

（4）菌落的颜色为白色的是 ，原因是 。

（5）菌落③中的目的基因是否能表达，可采用的检测办法是 。

Answer 1