Question

7．幽门螺杆菌是栖息在胃黏膜的螺旋状短杆菌，具有很强的脲酶活性．如表是某实验小组培养幽门螺杆菌所用培养基的配方（培养细菌一般用牛肉膏蛋白胨培养基）．请分折回答下列问题：

成分	葡萄糖	KH2PO4	MgSO4	NaCl	CaSO4	CaCO3	琼脂	蒸馏水
含量	10g	0.2g	0.2g	0.2g	0.2g	5g	3.5g	1L

（1）实验室筛选微生物通常须人为提供有利于目的菌生长的温度、pH、营养（至少答三种）等条件，抑制或阻断其他微生物的生长，能达到此目的培养基称为选择培养基．在实验中，为使培养基能达到此目的，需设置对照组，对照组所用的培养基一般是牛肉膏蛋白胨培养基．
（2）将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中，最常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法．置于37℃下培养一段时间后，该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时少，主要原因是该培养基中缺少氮源．
（3）在选择培养幽门螺杆菌时，培养基中要加入尿素和酚红指示剂，这是因为幽门螺杆菌可以合成脲酶，能分解尿素．若有幽门螺杆菌，则菌落周围会出现红色环带．
（4）某小组采用平板划线法分离该细菌．在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．

Answer 1

分析 1、培养基的营养构成
①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；
②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）微生物的生长需要适宜的温度和PH，同时还需要提供有利于微生物的营养物质，营养物质一般包括碳源、氮源、水分、无机盐．如果该培养基的培养条件能抑制或阻断其他微生物的生长，能达到此目的培养基称为选择培养基．在实验中，为使培养基能达到此目的，需设置对照组，对照组所用的培养基一般是牛肉膏蛋白胨培养基．
（2）微生物常见的接种的方法有 稀释涂布平板法和平板划线法．分析表格可知，由于培养基中缺乏氮源，幽门螺杆菌不能正常生活，所以数量会减少．
（3）在选择培养幽门螺杆菌时，培养基中要加入尿素和酚红指示剂，这是因为幽门螺杆菌可以合成脲酶，能分解尿素．若有幽门螺杆菌，则菌落周围会出现红色环带．
（4）平板划线法分离细菌过程中，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落．
故答案为：
（1）温度、pH、营养（“营养”也可答成“碳源、氮源、水分、无机盐”）  选择培养基  牛肉膏蛋白胨
（2）稀释涂布平板法       该培养基中缺少氮源
（3）脲酶  红
（4）将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落（答案合理即可给分）

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分、种类以及培养基的制备，能够根据表格获取有效解题信息，难度适中．