Question

【题目】基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选．已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC﹣，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是﹣↓GATC﹣．根据图示判断下列操作正确的是（　　）

A.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
C.质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
D.质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

【答案】D
【解析】解：限制酶I的识别序列和切点是﹣G↓GATCC﹣，限制酶II的识别序列和切点是﹣↓GATC﹣，可知限制酶II能够识别和切割限制酶I切割后的黏性末端．据题图可知，目的基因两端分别是限制酶I的识别序列和切点是﹣G↓GATCC﹣和限制酶II的识别序列和切点是﹣↓GATC﹣，只有用限制酶II才能将目的基因切割下来．质粒有GeneI和GeneⅡ表示两种标记基因，分别有限制酶II的识别序列和限制酶I的识别序列；如果用限制酶II切割，则GeneI 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶I切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA．

故答案为：D．

限制酶Ⅱ能识别限制酶I的序列，而限制酶I不能识别限制酶Ⅱ的序列，质粒只需一个切口，而目的基因需要两个切口，据此分析回答。