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PCR技术的原理类似于细胞内DNA的复制，短时间内就可以在体外将目的基因扩增放大几百万倍。下列关于PCR技术的推测，不可能的是

A.
PCR技术在短时间内将目的基因放大几百万倍，因而对基因工程的操作有极大帮助
B.
用PCR技术扩增目的基因，需要模板、原料、酶和能量等条件
C.
用PCR技术扩增目的基因，也遵循碱基互补配对原则
D.
如果目的基因共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个，用PCR技术扩增4代，需要8640个胞嘧啶脱氧核苷酸

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科目：高中生物 来源：2012届天津市天津一中高三入学摸底考试生物试卷 题型：综合题

请回答基因工程方面的有关问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为  。
②在第   轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。

①第1组：引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效； ②第2组：         。
(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为                       。

(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb
即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。