[题目]科研人员利用基因工程技术将乙烯合成酶的反义基因导入番茄中获得了耐储存的转基因番茄.其原理如图所示:(1)番茄果实内发育中的种子会产生较多 .该激素达到一定的浓度后.会促进乙烯的合成.从而加快果实成熟.(2)培育该转基因番茄过程中.目的基因是 .核心步骤是 .若要迅速获得大量目的基因.常用的技术是 .(3)重组质粒导入番茄细胞时.� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】科研人员利用基因工程技术将乙烯合成酶的反义基因导入番茄中获得了耐储存的转基因番茄，其原理如图所示：

（1）番茄果实内发育中的种子会产生较多__________，该激素达到一定的浓度后，会促进乙烯的合成，从而加快果实成熟。

（2）培育该转基因番茄过程中，目的基因是__________，核心步骤是__________。若要迅速获得大量目的基因，常用的技术是__________（写中文全称）。

（3）重组质粒导入番茄细胞时，可以先让番茄细胞经过__________得到愈伤组织，再把愈伤组织浸入含有重组质粒的__________菌液中，通过该菌的__________作用使目的基因进入番茄细胞。这种方法往往需要将目的基因结合到__________上，并最终将目的基因插入番茄细胞的__________上。

（4）据图分析，乙烯合成酶的反义基因与乙烯合成酶基因的异同是__________。转基因番茄中乙烯含量低的原因是__________。

（5）采摘后的这种转基因番茄耐储存，但不能正常成熟，为了在食用前让其成熟，可采用的措施是____。

【答案】生长素乙烯合成酶的反义基因构建基因表达载体聚合酶链式反应脱分化重组质粒的农杆菌转化 Ti质粒的T-DNA 染色体DNA 组成它们的碱基对的种类、数量和排列顺序都相同，但转录mRNA的模板链不同乙烯合成酶的反义基因转录出的mRNA与乙烯合成酶基因转录出的mRNA进行碱基互补配对，形成了双链RNA，从而阻断了乙烯合成酶基因表达的翻译过程喷洒乙烯利

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）发育中的种子会产生较多生长素，当生长素达到一定浓度后，促进乙烯的合成，从而加快果实成熟。

（2）本实验的目的是“将乙烯合成酶的反义基因导入番茄中获得了耐储存的转基因番茄”，所以目的基因是乙烯合成酶的反义基因，从图中看出；基因工程的核心步骤是构建基因表达载体；如果要大量获得目的基因需要对目的基因进行扩增，常用PCR技术（聚合酶链式反应）。

（3）重组质粒导入番茄细胞时，可以先让番茄细胞经过脱分化得到愈伤组织；再把愈伤组织浸入到含有重组质粒的农杆菌菌液中；通过该菌的转化作用使目的基因进入番茄细胞。这种方法往往需要将目的基因结合到Ti质粒的T-DNA上；并最终将目的基因插入到番茄细胞的染色体DNA。

（4）乙烯合成酶的反义基因与乙烯合成酶基因的异同是组成它们的碱基对的种类、数量和排列顺序都相同，但转录mRNA的模板链不同；乙烯合成酶的反义基因转录出的mRNA与乙烯合成酶基因转录出的mRNA进行碱基互补配对，形成了双链RNA，从而阻断了乙烯合成酶基因表达的翻译过程，所以转基因番茄中乙烯含量低。

（5）采摘后的这种转基因番茄耐储存，但不能正常成熟，为了在食用前让其成熟，可采用的措施是喷洒乙烯利，因为乙烯利具有促进果实成熟的作用。

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