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    【题目】凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。研究人员运用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中并使之表达。下图是基因工程中获得的基因和构建重组质粒过程，请回答有关问题：

    （1）分析上图可知，构建重组质粒（如图所示）最好选用 限制酶，理由是 。

    （2）工业生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，将目的基因导入大肠杆菌或芽孢杆菌前所做的处理方法是 。现在生产凝乳酶多采用重组毛霉或重组酵母菌，毛霉或酵母菌作为受体细胞的优势是 。

    （3）研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是 ，该生物工程技术的实质是 。

    （4）转基因技术和细胞工程在动植物中都有广泛应用，但是胚胎工程只是指对动物的 所进行的多种亚显微操作和处理技术。

    【答案】（1）BamHI和PstI 提高重组DNA的比例（防止自身的黏性末端连接或防止目的基因与载体反向连接）

    （2）用钙离子处理细胞，使之转化为感受态细胞

    含有的内质网和高尔基体可对蛋白质进行加工和修饰

    （3）蛋白质工程 基因工程的延伸（或在基因工程基础上，延伸出来的第二代基因工程）

    （4）配子或早期胚胎

    【解析】

    试题分析：（1）限制酶不能破坏目的基因，也不能破坏质粒上的标记基因，且应该用不同的限制酶进行切割，以防止自身的黏性末端连接或防止目的基因与载体反向连接，所以构建图示的重组质粒应该选择BamHI和PstI。

    （2）基因工程中，将目的基因导入大肠杆菌等微生物细胞时，需要用氯化钙处理大肠杆菌，使之转化为感受态细胞，便于目的基因的导入。毛霉或酵母菌含有的内质网和高尔基体可对蛋白质进行加工和修饰，所以生产凝乳酶多采用毛霉或酵母菌作为受体细胞。

    （3）根据题意分析，通过改造凝乳酶的氨基酸，提高了其催化功能，利用的是蛋白质工程，该过程的实质是基因工程的延伸，又称为第二代基因工程。

    （4）胚胎工程只是指对动物的配子或早期胚胎所进行的多种亚显微操作和处理技术。

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