Question

5．某研究小组进行药物试验时，以动物细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性．供培养的细胞有甲、乙两种，甲为骨髓瘤细胞，乙为经免疫过的正常浆细胞．请答题：
（1）将数量相等的甲和乙分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同且适宜．一段时间后，观察到的现象是甲增多，乙不增多．
（2）动物细胞培养需要满足一定的条件，下列有关表述正确的有①②（选择填写下列条件前的序号）．
①对培养液和培养用具进行无菌处理，在细胞培养液中添加一定量的抗生素，定期更换培养液，这些做法都有利于提供一个无菌无毒的培养环境
②在使用合成培养基时，通常需加入血浆等天然成分
③所有动物细胞培养的适宜温度均为36.5±0.5℃，多数哺乳动物细胞生存的适宜pH为7.0左右
④动物细胞培养所需的气体只是O₂，因为O₂是细胞代谢所必需
⑤培养液中需添加一定浓度和比例的生长素与细胞分裂素，以诱导细胞脱分化和再分化
（3）药物试验需要大量细胞，甲乙看来都不适合用于试药，理由是：甲有部分基因已经发生了变异，药物对甲的效果不一定与正常体细胞的效果相同，乙在体外培养不能增殖，不能得到大量细胞用于试药．．
（4）令甲乙细胞融合，所获杂交细胞在体外培养条件下，具有既能增殖，又能产生专一抗体的特点．
（5）已知癌细胞中X基因过量表达与骨髓瘤的发生密切相关．要试验一种抗肿瘤药物Y对甲生长的影响，可将甲分为A、B两组，A组细胞培养液中加入Y，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，在相同且适宜条件下培养一定时间后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的合成mRNA和蛋白质水平的差异，以确定Y的药效．

Answer 1

分析 1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
（3）温度和PH．
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的PH）．

解答 解：（1）已知甲细胞为骨髓瘤细胞，乙正常细胞为浆细胞．将数量相等的甲和乙分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同且适宜．一段时间后，观察到的现象是甲增多，乙不增多．
（2）解：①对培养液和培养用具进行无菌处理，在细胞培养液中添加一定量的抗生素，定期更换培养液，这些做法都有利于提供一个无菌无毒的培养环境，①正确；
②在使用合成培养基时，通常需加入血浆等天然成分，②正确；
③细胞体外培养的适宜温度和动物体温相近，哺乳动物动物多以36.5±0.5℃为宜，多数动物细胞生存的适宜pH为7.2-7.4，③错误；
④动物细胞培养所需的气体主要有氧气和二氧化碳，O₂是细胞代谢所必需，二氧化碳主要维持培养液的PH．④错误；
⑤动物细胞培养，不需要添加植物激素，⑤错误．
故选：①②．
（3）药物试验需要大量细胞，甲乙看来都不适合用于试药，因为甲有部分基因已经发生了变异，药物对甲的效果不一定与正常体细胞的效果相同，乙在体外培养不能增殖，不能得到大量细胞用于试药．
（4）甲乙细胞融合，所获杂交细胞在体外培养条件下，具有既能增殖，又能产生专一抗体的特点．
（5）该实验的目的是试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，因此自变量为是否加入Y，B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，则A组细胞培养液中应加入等量Y．已知基因X表达与肝肿瘤的发生密切相关，而基因X的表达包括转录和翻译两个步骤，抗癌药物Y的作用可能是抑制基因X的转录过程，也可能是抑制其翻译过程，因此通过分别检测基因X在A、B两组细胞中的mRNA或相关蛋白质合成水平的差异，可以确定Y的药效．
故答案为：
（1）甲增多，乙不增多
（2）①②
（3）甲有部分基因已经发生了变异，药物对甲的效果不一定与正常体细胞的效果相同，乙在体外培养不能增殖，不能得到大量细胞用于试药
（4）既能增殖，又能产生专一抗体的特点
（5）Y  mRNA和蛋白质

点评 题以药物试验为背景，考查癌细胞的主要特征、动物细胞培养、探究实验，要求考生识记动物细胞培养的过程及动物细胞培养的条件；识记癌细胞的主要特征；明确实验的目的，理解实验的原则，能结合转录和翻译的过程答题．