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    13．我国科学家张道远先生通过从耐旱灌木白花柽柳中克隆得到TSOD基因，利用转基因技术转化到棉花中，获得了具备更强抗旱性的T4代转基因棉花株系．下图为转基因抗旱棉花的培育过程示意图，请据图回答下列问题：

    （1）①过程表示用PCR技术扩增目的基因，该过程使用到的酶是热稳定DNA聚合酶．
    （2）步骤③一般用Ca2+（或CaCl2）处理农杆菌，使其易吸收周围环境中的DNA分子．除图中所示的农杆菌转化法外，还可采用花粉管通道法（基因枪法）方法将基因导入植物细胞．
    （3）外植体培养成为试管苗的过程采用了植物组织培养技术，利用了植物细胞的全能性的原理，步骤⑤⑥表示脱分化、再分化．
    （4）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段．若利用该片段构建基因表达载体，应选用图中的何种Ti质粒？甲

    （5）为了确定抗旱转基因棉花是否培育成功，可先用放射性同位素标记的抗旱基因（TSOD基因、目的基因）作探针进行分子水平鉴定，再移栽到干旱土地中进行个体水平鉴定棉花植株的抗旱性．

    分析 分析图，可知①是获取目的基因，②是构建基因表达载体，③导入目的基因，④用目的农杆菌感染植物细胞，并转化目的基因，⑤是脱分化，⑥是再分化，⑤⑥是利用植物组织培养技术将细胞培养成完整植株的过程．

    解答 解：（1）①过程表示用PCR技术扩增目的基因，PCR技术中利用高温解链，因此不需要解旋酶，但是需要热稳定性的DNA聚合酶．
    （2）步骤③中将重组质粒导入农杆菌，一般用Ca2+处理农杆菌，使其变为感受态，易吸收周围环境中的DNA分子．将目的基因导入植物细胞有农杆菌转化法、基因枪法等．
    （3）外植体培养成为试管苗常采用植物组织培养技术，该技术能够体现植物细胞的全能性的，步骤⑤⑥分别表示脱分化、再分化．
    （4）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段．
    甲、该Ti质粒中含有限制酶XbaI和SacI的切割位点，且用这两种酶切割可将目的基因插入T-DNA中，甲正确；
    乙、该Ti质粒中不含限制酶SacI的切割位点，乙错误；
    丙、该Ti质粒中含有限制酶XbaI和SacI的切割位点，但用这两种酶切割不会将目的基因插入T-DNA中，丙错误；
    丁、该Ti质粒中不含限制酶XbaI的切割位点，丁错误．
    故选：甲．
    （5）为了确定抗旱转基因棉花是否培育成功，可先用放射性同位素标记的抗旱基因（TSOD基因、目的基因）作探针进行分子水平鉴定，再移栽到干旱土地中进行个体水平鉴定棉花植株的抗旱性．
    故答案为：
    （1）PCR技术　热稳定DNA聚合酶
    （2）Ca2+（或CaCl2） 　花粉管通道法（基因枪法）
    （3）植物组织培养　植物细胞的全能性　  脱分化   再分化
    （4）甲
    （5）抗旱基因（TSOD基因、目的基因）　移栽到干旱土地中

    点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具、操作步骤，掌握各步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题．

    练习册系列答案
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    3．在细胞增殖过程中，染色体和 都有复制和加倍的过程，下列相关叙述不正确的是（　　）
    A．经复制后染色体数量是之前的二倍
    B．细胞中b、d过程发生在细胞分裂间期
    C．细胞中a过程发生在细胞分裂间期
    D．细胞中c过程发生在细胞有丝分裂后期

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    4．下列保护生物多样性的措施中，最有效的是（　　）
    A．进行组织培养B．建立自然保护区
    C．建立精子库、种子库D．建立动物园、植物园

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    1．胭脂红是一种水溶性的大分子食用色素，呈红色．用无色洋葱鳞片叶表皮制备“观察细胞质壁分离及复原实验”的临时装片时，可用高浓度（质量浓度为0.075g/mL）的胭脂红溶液作为外界溶液，观察细胞的变化．下列有关实验操作和结果的叙述，正确的是（　　）
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    B．发生细胞质壁分离复原现象时，表皮细胞内的无色区域变大
    C．用不同浓度的胭脂红溶液处理细胞后，均能观察到质壁分离和复原现象
    D．当质壁分离不能复原时，细胞仍具正常生理功能

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    8．如图为动物体细胞核移植过程流程图，下列相关叙述不正确的是（　　）
    A．该过程中用到的动物细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合等
    B．去掉受体卵母细胞的核的目的是使核移植动物的遗传物质几乎全部来自有利用价值的动物提供的细胞
    C．核移植的供体细胞一般都选传代10代～50代左右的细胞
    D．该技术下生出的犊牛并不是供体动物100%的复制

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    18．现有纯种柱形褐变苹果和圆形无褐变苹果．某果树研究人员用杂交育种培育出了拥有自主产权的柱形无褐变苹果新品种．请回答一下问题：
    （1）杂交育种时必需采取人工授粉，理由是能人为控制（有目的性）品种间杂交．
    （2）已知苹果的柱形对圆形显性，有褐变对无褐变显性，分别受等位基因A、a和B、b控制，且两对基因独立遗传．苹果种子萌发成的幼苗要5年以上才能开花结果，对苹果基因进行DNA分子标记能缩短育种时间，方法是将亲代生殖器官的柱形基因和无褐变基因所在的DNA与荧光染料DNA分子特异性结合，在F2幼苗期，对有丝分裂中期细胞染色体进行荧光染色，细胞中荧光标记染色体的数量共有5种，分别是01234，其中稳定遗传的柱形无褐变细胞的荧光标记的染色单体有8个．
    （3）嫁接是快速推广柱形无褐变新品种简易方法，用于嫁接的枝条可来自于第（2）问F2中全部的柱形无褐变（填“全部的柱形无褐变”或“纯合的柱形无褐变”）植株．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

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    C．de段种群的增长速率为负值，其主要原因是营养物质的缺乏
    D．本实验中不存在对照，酵母菌个体数常用抽样检测法获得

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    B．上述过程需要使用的工具酶之一是RNA聚合酶
    C．PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增
    D．SRY探针能与雄性胚胎样品中DNA配对

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