【题目】CRISPR-Cas9技术又称为基因编辑技术，该技术在基因的上下游各设计一条向导RNA（向导RNA1，向导RNA2），将其与含有Cas9蛋白编码基因的质粒一同转入细胞中，向导RNA（gRNA）通过碱基互补配对可以定位与靶向基因结合，Cas9蛋白会使该基因上下游的DNA双链断裂，断裂的基因上下游两端的序列连接起来，从而实现了细胞中目标基因的敲除。回答下列问题：
（1）CRISPR-Cas9系统广泛存在于细菌体内，推测该系统在细菌体内的作用是___________________。
（2）基因表达载体的启动子位于________________，是RNA聚合酶识别和结合的部位。目的基因导入受体细胞后，成功产生了Cas9蛋白和gRNA。gRNA能够定位靶向基因的原理是________________。
（3）Cas9蛋白会使该基因上下游的DNA双链断裂，由于________________，会将断裂上下游两端的序列连接起来，从而实现了细胞中目标基因的敲除。从根本上剔除老鼠细胞中的目标基因（肥胖基因），常选用________________作为改良对象，理由是________________________________________________。
（4）科学家从癌症患者血液中提取某种细胞，利用基因编辑技术加入一个帮助这种细胞定向清除癌细胞的新基因序列，然后再把这些细胞注入患者血液中，以达到杀死癌症细胞的目的，这些细胞是人体的________________细胞，由于该细胞中的PD-1蛋白会引起免疫耐受，减弱对癌细胞的定向清除作用，临床上可以通过 CRISPR-Cas9技术剔除________________，从而重新激活淋巴细胞对肿瘤细胞的攻击能力。
【答案】切割外源DNA，从而达到保护自身的目的 基因的首端 碱基互补配对 细胞中存在DNA连接酶 桑椹胚前的细胞 桑椹胚前的细胞具有发育成完整胚胎的潜能 效应T细胞 控制PD-1蛋白合成的基因
【解析】
该题主要考察了基因工程的相关知识，由于CRISPR-Cas9技术实现了对目标基因的定位和切割，所以涉及基因的切割和拼接，一般切割DNA的酶为限制性核酸内切酶，其主要来源于原核细胞。拼接DNA的工具为DNA连接酶，其可以把具有相同黏性末端的DNA片段连接起来。
（1）CRISPR-Cas9系统是原核生物定向切割DNA去除部分基因的系统，可以切割外源DNA，使之失效从而达到保护自身的目的；
（2）启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶的识别和结合位点，驱动基因转录；gRNA能够与靶向基因碱基互补配对，依据这一原理可以实现靶向定位相关基因；
（3）Cas9蛋白会使该基因上下游的DNA双链断裂，其作用类似于限制酶，会产生相同的黏性末端，而生物个体的细胞中存在DNA连接酶，会将断裂的上下游两端的序列连接起来，从而实现了细胞中目标基因的敲除；从根本上剔除老鼠细胞中的目标基因常常选择桑椹胚前的细胞，该部分细胞具有较强的全能性，具有发育成一个完整胚胎的潜能，因此对该时期的细胞进行改造，可以使得发育成的个体不含有目标基因；
（4）对癌细胞的清除主要依靠效应T细胞来完成，使用基因编辑技术加入一个帮助效应T细胞定向清除癌细胞的新基因序列，然后再把效应T细胞注入患者血液中，可以达到杀死癌症细胞的目的；由于PD-1蛋白会引起免疫耐受，所以使用CRISPR-Cas9技术剔除控制PD-1蛋白合成的基因，可以消除PD-1蛋白会引起免疫耐受，从而激活淋巴细胞的攻击力。
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【题目】在一个经长期随机交配形成的自然鼠群中，已知毛色由一对等位基因控制，已知A控制黄色，a1控制灰色，a2控制黑色，显隐性关系为A＞a1＞a2，且AA纯合胚胎致死。请分析回答相关问题。
（1）两只鼠杂交，后代出现三种表现型。则该对亲本的基因是_______，它们再生一只黑色雄鼠的概率是________。
（2）现进行多对Aa1×a1a2的杂交，统计结果平均每窝出生8只小鼠。在同样条件下进行许多Aa2×Aa2的杂交，预期每窝平均生______只黄色小鼠。
（3）现有一只黄色雄鼠和多只其他各色的雌鼠，如何利用杂交方法检测出该雄鼠的基因型？
实验思路及预测结果：实验思路：_________________________。
预测结果：若子代表现型及比例为_______________________，则该黄色雄鼠基因型为Aa1。
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【题目】“生命观念”是指对观察到的生命现象及相互关系或特性进行解释后的抽象，是人们经过实证后的观点。下列说法错误的是（ ）
A.溶酶体膜内侧存在与细胞膜表面糖蛋白类似的结构，可防止溶酶体膜自身被酸性水解酶水解，体现了结构与功能相适应
B.细胞内的吸能反应一定与ATP水解的反应相联系，放能反应一定与ATP的合成相联系
C.人体内环境的稳态与激素神经递质淋巴因子等的作用有关
D.猎物可通过快速奔跑来逃脱被捕食,而捕食者则通过更快速的奔跑来获得捕食猎物的机会,猎物和捕食者的每一点进步都会促进对方发生改变，这种现象在生态学上称为共同进化
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【题目】负反馈调节在生命系统中普遍存在。下列有关说法错误的是（ ）
A.细胞外液渗透压调节的过程中存在着负反馈调节
B.大兴安岭森林群落演替过程中存在着负反馈调节
C.蛋白A可增强自身编码基因的表达，这是负反馈调节过程
D.晚期癌症病人身体状态每况愈下时，负反馈调节大多缺失
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【题目】近年来，现代生物科技在生产、生活、医学领域有广泛应用。回答相关问题。
（1）我国科学家发明了转基因抗虫棉。科学家所构建的Ti质粒上具有________________，它能把抗虫基因整合到受体细胞________________上。我国科学家还独创了________________法将抗虫基因导入受体细胞。
（2）我国科学家先后通过猴胚胎细胞和体细胞获得克隆猴。克隆猴与供体猴的遗传物质________________（填“完全相同”或“基本相同”或“完全不同”）。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是：________________________________________________。
（3）畜牧业胚胎工程已产业化。胚胎分割所需要的主要仪器设备为________________显微镜和显微操作仪。胚胎移植程序中要对供、受体母畜进行同期发情处理，目的是：_________________________。
（4）生物科技发展迅速，并广泛而深入地向人类社会渗透。由于科学发展水平的限制、以及外源基因插入部位的随机性等，引起了公众对转基因生物安全性的激烈争论，主要涉及________________等方面（写出三点）。
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【题目】醪糟是以糯米为主要原料，利用微生物发酵制作的民间传统食品。在醪糟发酵过程中起主要作用的是甜酒曲中的好氧霉菌、酵母菌和乳酸菌，醪糟的生产流程如下：糯米的选择→淘洗→浸泡→蒸饭→冷却→拌甜酒曲→发酵→煮沸→保存。回答下列问题：
（1）霉菌产生的_____________能将糯米中的淀粉分解，使醪糟具有甜味；同时，乳酸菌发酵产物__________________是醪糟产生酸味的主要来源。
（2）生产过程中，温度、氧气等条件的控制非常重要。
①拌入甜酒曲之前，需将蒸熟的糯米进行冷却，发酵过程中需要调整温度，发酵完成后又需煮沸处理，煮沸的目的是____________________________________________________；
②发酵前期应保证氧气的供应，使______________________大量繁殖；后期应减少空气进入或隔绝空气，有利于___________________________________________________________。
（3）发酵好的醪糟煮沸后，可转移到灭菌玻璃瓶中密封保存，密封之前应对瓶口进行_________________灭菌，防止瓶口被污染。
（4）若要大规模生产醪糟，除了严格控制发酵条件外，还需要纯化菌种，通常纯化的方法有_________________；为了降低生产成本和提高产品质量，可以采取____________________技术。
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【题目】人的T细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质（Y）。该蛋白质由一条多肽链组成。目前可以利用现代生物技术生产Y。回答下列问题。
（1）若要获得Y的基因，可从人的T细胞中提取_____________作为模板，在_____________催化下合成cDNA。再利用_____________技术在体外扩增获得大量Y的基因。
（2）将目的基因导入植物细胞常用的方法是_____________，将上述所得Y的基因插入_____________中，得到含目的基因的重组Ti质粒，则可用该转化法将该基因导入某种植物的叶肉细胞中。若该叶肉细胞经_____________得到了能稳定表达Y的愈伤组织，则说明Y的基因已经_____________。
（3）天然的Y通常需要在低温条件下保存。假设将Y的第6位氨基酸甲改变为氨基酸乙可提高其热稳定性，若要根据蛋白质工程的原理对Y进行改造以提高其热稳定性，具体思路是_____________。
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【题目】糖尿病是影响人类健康的重大疾病，利用基因工程结合细胞工程、胚胎工程生产胰岛素为糖尿病人带来福音，请回答下列有关问题
（1）大肠杆菌是生产胰岛素常用的工程菌，其优点是_______________（至少答出两点），但得到的胰岛素需要进一步加工和修饰才能获得生物活性，原因是_____________________。
（2）转胰岛素基因牛可通过分泌乳汁来生产人胰岛素，在转入牛受精卵的基因表达载体中，人胰岛素基因的首端必须含有___________。还需对胚胎的性别进行鉴定；在囊胚期取___________细胞进行性别鉴定。为提高胚胎的利用效率，可以通过胚胎分割技术得到同卵双犊，在分割时，应将___________均等分割。
（3）为检测人胰岛素基因是否被导入并正常表达，可采用的方法有__________（填序号）。
①DNA分子杂交 ②染色体倍性分析
③体细胞结构分析 ④抗原—抗体杂交
（4）用基因工程生产的胰岛素被注射到患者血液中容易被分解，使治疗效果受到影响，可通过___________（填技术手段）对传统胰岛素进行改造，生产出不易被分解的高效胰岛素。
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【题目】下列关于种群和群落的叙述，正确的是（ ）
A.种群是生物进化的基本单位，种群内出现个体变异是普遍现象
B.退耕还林、退塘还湖、布设人工鱼礁之后都会发生群落的初生演替
C.习性相似物种的生活区域重叠得越多，对资源的利用越充分
D.两只雄孔雀为吸引异性争相开屏，说明行为信息能够调节种间关系
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