Question

【题目】治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下：

(1)过程①采用的是细胞工程中的__________技术。体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液(基)的_______________。

(2)去除细胞核时普遍使用___________去核法，过程②采用的物理方法是________________。

(3)如果克隆过程中需进行基因改造，在构建基因表达载体(重组载体)时必须使用________和________两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外，还需有__________基因，以便选出成功导入基因表达载体的细胞。

(4)在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体____________(填“A”或“B”)，则不会发生免疫排斥反应。

Answer 1

【答案】核移植 pH(或：酸碱度) 显微操作 电脉冲 限制酶 DNA连接酶 标记 B

【解析】

试题本题考查动物体细胞核移植技术、治疗性克隆等知识，意在提升学生分析问题和解决问题的能力。需要学生掌握以下知识点：1、治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类需要的个体。3、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。分析题图可知：①是核移植技术，②是早期胚胎培养。据此答题。

（1）过程①采用的是细胞工程中的核移植技术，体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，后者的作用是维持培养液（基）的pH。

（2）目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法，过程②是早期胚胎培养，一般采用的物理方法是用电脉冲刺激重组细胞促使其形成早期胚胎。

（3）在构建基因表达载体(重组载体)时必须使用限制酶和DNA连接酶两种工具酶。还需有标记基因，以便选出成功导入基因表达载体的细胞。

（4）胚胎干细胞可以来自于囊胚中的内细胞团，若将图中获得的组织器官移植给个体B不会发生免疫排斥反应。因为B是供核的一方，克隆的组织和器官的绝大多数遗传物质与B相同。