Question

如图1表示“华恢1号”抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

（1）杀虫基因通过①～④，最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做

 

．
（2）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造．图2是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制酶作用位点），据图分析人工改造质粒时：
①要使抗虫基因能成功表达，还应插入

 

、

 

．
②用限制酶Ⅰ处理，其目的是：去除质粒上的

 

和

 

（基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长；
③若用限制酶Ⅱ分别切割经过②过程改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒．分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的情况是

 

．
（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：1、图1所示，①时基因表达载体的构建，②将目的基因导入受体细胞，③用农杆菌侵染水稻胚细胞，④植物组织培养．图2是基因表达载体，其组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．标记基因可以筛选出含有目的基因的细胞．
2、“分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的．
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．

解答： 解：（1）杀虫基因通过①～④，转化是指将目的基因导入受体细胞中，最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程．
（2）①基因表达载体组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，要使抗虫基因能成功表达，还应插入启动子、终止子．
②tms的编码产物控制合成吲哚乙酸和tmr的编码产物控制合成细胞分裂素．因此用限制酶I处理tms和tmr基因，可以保证T-DNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长．
③若用限制酶Ⅱ分别切割经过②过程，破坏了四环素抗性基因，受体细胞不具有抗四环素功能，但可以抗卡那霉素．分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞在含卡那霉素的培养基中能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长．
（3）根据碱基互补配对原则，可以将限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端配对完整，形成DNA链为

GACGTC

CTGCAG

，则该酶识别的核苷酸序列是GACGTC．
故答案为：
（1）转化
（2）①启动子、终止子　②tms、tmr
③在含卡那霉素的培养基中能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长
（3）GACGTC

点评：本题考查了基因工程的原理及技术的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．