Question

15．如表是几种限制酶识别序列和切割位点，如图为培育转基因抗虫棉的技术流程，请据图回答：

限制酶	BamHⅠ	BfuCⅠ	XmaⅠ	SmaⅠ
识别序列及切割位点	G↓GATCC	↓GATC	C↓CCGGG	CCC↓GGG

（1）依据表中四种酶切割位点，会形成相同末端的是BamHⅠ和 BfuCⅠ，从不同酶的识别序列上看，限制酶的作用特点是能识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割双链DNA．
（2）根据表中酶切位点，请写出BamHⅠ切割后形成的末端：．
（3）图中过程①中涉及的酶是限制酶和DNA连接酶，该过程是基因工程的核心步骤，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并能遗传给下一代，同时能表达并发挥作用．
（4）图中过程②最常用的方法是农杆菌转化法，检测抗虫基因是否整合到棉花细胞DNA分子上的方法是DNA分子杂交技术．
（5）经检测抗虫棉细胞染色体上含有一个抗虫基因，该植株自交得到F_l，其中全部的抗虫植株再自交一次，后代中抗虫植株占总数的$\frac{5}{6}$．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：①是基因表达载体的构建过程，②是将目的基因导入受体细胞的过程，③是脱分化过程，④是再分化过程．
基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．

解答 解：（1）依据表中四种酶切割位点，会形成相同末端的是BamHⅠ和BfuCⅠ，产生的末端都是-GATC-；从不同酶的识别序列上看，说明限制酶具有能识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割双链DNA的作用特点．
（2）根据表中酶切位点，BamHⅠ切割后形成的末端是．
（3）在基因表达载体的构建过程中，涉及的酶是限制酶和DNA连接酶，该过程是基因工程的核心步骤，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并能遗传给下一代，同时能表达并发挥作用．
（4）图中过程②是将目的基因导入受体细胞，最常用的方法是农杆菌转化法；检测抗虫基因是否整合到棉花细胞DNA分子上的方法是DNA分子杂交技术．
（5）抗虫棉细胞染色体上含有一个抗虫基因（用A表示），那么该植株可看做是杂合子（Aa），自交得到的F_l有三种基因型（AA、Aa、aa），如果其中全部的抗虫植株（$\frac{1}{3}$AA、$\frac{2}{3}$Aa）再自交一次，那么后代中不抗虫植株占$\frac{2}{3}×\frac{1}{4}$=$\frac{1}{6}$，抗虫植株占1-$\frac{1}{6}$=$\frac{5}{6}$．
故答案为：
（1）BamHⅠ和BfuCⅠ能识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割双链DNA．
（2）
（3）限制酶和DNA连接酶     使目的基因在受体细胞中稳定存在并能遗传给下一代，同时能表达并发挥作用
（4）农杆菌转化法                   DNA分子杂交技术
（5）$\frac{5}{6}$

点评 本题结合图解，考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中的相关细节，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．