Question

4．研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物，请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题．
（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C_l酶、C_X酶和葡萄糖苷酶．
（2）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但不与纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在倒平板时就加入刚果红．第一种（选答“第一种”或“第二种”）方法会使菌落之间发生混杂．
（3）如果观察到产生透明圈的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌．为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验．纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定．

Answer 1

分析 微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，包括内切酶（Cx酶）、外切酶（C1酶）和葡萄糖苷酶．内切酶作用于无定型的纤维素区域，使纤维素断裂成片段；外切酶又叫纤维二糖水解酶，它可以作用于纤维素的结晶区或小片段纤维素，从糖链末端开始切掉两个葡萄糖分子，产生纤维二糖；葡萄糖苷酶则将纤维二糖分解成葡萄糖．
刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，而不与水解后的纤维二塘和葡萄糖发生这种反应．
纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质．纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基，纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基．

解答 解：（1）纤维素酶是一种复合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶．
（2）刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，这种方法会使菌落之间发生混杂；第二种是在倒平板时就加入刚果红．其中第一种方法会使菌落之间发生混杂．
（3）刚果红与纤维素反应呈红色，纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色，在菌落周围会出现透明圈．为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验．纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定．
故答案为：
（1）葡萄糖苷  
（2）纤维二糖  葡萄糖  倒平板  第一种  
（3）透明圈    发酵产纤维素酶  葡萄糖

点评 本题难度适中，属于考纲中识记层次的要求，考查了从土壤中分离能分解纤维素的微生物的有关问题，要求考生能够识记纤维素酶中的三种酶的水解底物和产物；识记纤维素的鉴定原理、方法和现象等；识记纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基，纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基等知识．