Question

酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号 项目	I	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	V	Ⅵ
蒸馏水（mL）	2	O	1	1	1	1
缓冲液（mL）	0	2	1	0.5	0.5	0.5
果胶酶液（mL）	O	0	O	0.5	O	0
蜗牛酶液（mL）	O	0	O	O	0.5	0
纤维素酶液（mL）	0	O	0	O	0	0.5
实验结果（绿色深浅程度）	－	－	－	+++	++++	++

（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）

（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是           ，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。

（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有        等多种酶。该实验中        是空白对照组，其设置意义是                。

（3）用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用         洗涤。

（4）原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是                  。

Answer 1

（1）为了使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果

（2）果胶酶和纤维素酶      Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ    排除无关变量的干扰  

（3）等渗溶液

（4）低渗涨破法

解析:

本题考查有关酶的催化效率的实验，（1）实验过程中，需要轻摇试管，可以使细胞壁与酶充分接触，可以提高酶解效果（2）蜗牛以植物为食，所以唾液酶中含有果胶酶和纤维素酶，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ没有添加酶溶液为空白对照组。其目的是排除无关变量的干扰。（3）离心后收集沉淀物，并用等渗溶液清洗，目的是保持细胞正常形态。（4）要用低渗涨破法来检验原生质体是否符合要求，若没有细胞壁则可以涨破，有则不能涨破。