Question

【题目】三位高中生在某个炎热夏日相约去吃冰激凌，之后两人都出现腹泻现象，于是他们怀疑冰激凌中的大肠杆菌含量超标。老师建议他们利用所学有关微生物培养的知识对冰激凌进行检测。经查阅资料后，他们提出如下实验设计思路。

立即去卖冰激凌的小店再买一个同样品牌的同种冰激凌；配制伊红-亚甲基琼脂培养基（该培养基可用来鉴别大肠杆菌，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈现深紫色，并有金属光泽）、灭菌、倒平板；取10mL刚融化的冰激凌作为原液，然后进行梯度稀释，稀释倍数为1×10～1×105；取每个浓度的冰激凌液各0．1mL，用涂布平板法进行接种，每个浓度涂3个平板；在适宜温度下培养48小时，统计菌落数目。

（1）请你从下面3个角度对这三位同学的思路进行评议。

① 他们只打算对一个冰激凌进行检测，理由是：两个人吃过冰激凌后，都腹泻了，所以再检测一个就足以说明问题。你同意这样的观点吗？请阐述理由__________________。

② 有没有必要对冰激凌原液进行梯度稀释？请阐述理由____________________。（提示：我国卫生部门规定的饮用水标准是：37oC培养24h的条件下1mL自来水中细菌总数不可以超过100个；37oC培养48h的条件下1000mL自来水中大肠杆菌菌落不能超过3个）

③ 他们认为，在用该方法统计菌落数目时不需要设计对照组，所以只准备培养15个平板。你认为在这项检测中是否需要对照组？请阐述理由__________________。

（2）下图所示为4种菌落分布图，一般不能由涂布平板法得到的是_______。

（3） 如果以菌落数代表样品中的大肠杆菌数量，则统计结果比实际值是偏大还是偏小？请阐述理由__________________。

（4）如果实验结果显示检测的冰激凌中大肠杆菌超标了，接下来他们应该做什么？_____。

（5）2020年5月1日起，北京市实行新版《北京市生活垃圾管理条例》，在下列垃圾类别中，冰激凌包装袋、雪糕棒等属于_______。

A、厨余垃圾B、可回收物C、有害垃圾D、其他垃圾

Answer 1

【答案】不同意，因为检测样品少，不能确定是某个冰激凌的质量问题还是这个品牌冰激凌的质量问题 有必要，培养基的菌落数在30-300之间易于平板计数，如不稀释，可能会因菌落数过密而无法计数 需要，排除空白平板等无关变量对结果无干扰 D 偏小，因为两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。（偏大，在操作过程中被大肠杆菌污染，可能数目会增加） 向商家说明情况，或向有关部门投诉 D

【解析】

微生物的培养计数时使用稀释涂布平板法，统计公式为：C/V×M，其中C表示平均菌落数，V表示接种到平板上的菌液体积，M表示稀释倍数。

（1）①不同意，检测一个不能说明问题，具有偶然性，检测样品少，不能确定是某个冰激凌的质量问题还是这个品牌冰激凌的质量问题；

②为了好计数，使培养基的菌落数在30-300之间易于平板计数，有必要稀释，如不稀释，可能会因菌落数过密而无法计数；

③需要设置对照组，要检测培养基灭菌是否合格，以及排除空白平板等无关变量对结果无干扰；

（2）D图中菌落没有均匀生长，还有明显的划线痕迹，是平板划线法接种得到的，D不能由涂布平板法得到；

（3）严格无菌操作时，会偏小，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落；没有严格无菌操作时，也有可能会偏大，当操作过程中被大肠杆菌污染，可能数目会增加；

（4）如果实验结果显示检测的冰激凌中大肠杆菌超标了，应该向商家说明情况，或向有关部门投诉；

（5）冰激凌包装袋、雪糕棒等属于其他垃圾，故选D。