Question

【题目】酵母菌种群数量的增长与实验条件密切相关。科研人员试图研究酵母菌接种量和溶氧量对酵母菌种群数量增长的影响。 设计以下实验:

1．选择生长旺盛的酵母菌为实验材料，用移液器吸取设定的接种量（0．5mL、1．00mL、1．5mL） ，分别接种入相同体积的同种液体培养基。震荡摇匀，吸取酵母菌悬液观察计数作为初始值。将接种后的锥形瓶置于不同转速的摇床中，28℃恒温培养。

2．将锥形瓶中的培养液振荡摇匀，用吸管每隔2h取样1次，共取5 次。

3．取清洁干燥的血球计数板制作装片，先用低倍镜找到计数室，然后换成高倍镜观察计数。

4．记录测量结果，绘制相关曲线，结果如下图

分析图中数据，回答下列问题：

（1）结果要分析： 培养液中 的浓度。

（2）在实验实施过程中，一般要先采用 的方法对培养基进行灭菌。若制备装片时，将清洁干燥的血球计数板先在计数室上滴1小滴酵母菌液，静置5 min再盖上盖玻片，测量的结果会 。

（3）若本实验使用的计数板规格如右图，在计数时一般采用 法计数。

在实验中，最初计数时发现所选取的样方中方格酵母菌总数为零，这时正确的做法是：

A．将装片清洗干净，重新制备装片进行计数

B．将样液稀释后重新进行制备装片并计数

C．寻找有酵母菌的中方格，然后取其平均值计数

D．直接统计中间整个大方格中的细胞总数

（4）分析实验数据图，可以发现条件为 时测得种群密度最高，此时的酵母菌培养液不适合用来制作固定化酵母，原因是 。适合制作固定化酵母的酵母菌培养液条件为 。

Answer 1

【答案】

（1）接种量 氧气

（2）高压蒸汽灭菌 偏高

（3）五点取样法 D

（4）转速250r/min，接种量为1．5mL,培养第六个小时 种群达到峰值后，由于营养大量消耗、代谢产物增加，酵母菌大量死亡影响固定化酵母的活性 转速230r/min，接种量为1．5mL,培养第8个小时

【解析】

（1）要研究酵母菌接种量和溶氧量对酵母菌种群数量增长的影响，因此自变量为酵母菌接种量和溶氧量，因此结果要分析接种量培养液中的氧气浓度。

（2）对培养基要用高压蒸汽灭菌法对其进行灭菌，先将培养液滴加到血球计数板的计数室中再盖上盖玻片计数，由于已加入的液滴的表面张力作用使其未能严密的盖到计数板表面上，使计数室内的体积增大，从而使计数结果偏高。

（3）血球计数板计数时一般采用五点取样法，已减少误差。所选取的样方中方格酵母菌总数为零，可以直接统计中间整个大方格中的细胞总数。

（4）由曲线结果可知，条件为250r/min，接种量为1．5mL，培养第六个小时，测得种群密度最高。制作固定化酵母，要保持酵母活性高，但当种群达到峰值后，由于营养大量消耗、代谢产物增加，酵母菌大量死亡，酵母菌的活性减低，因此不适合做固定化酵母细胞。种群数量少，适合做固定化酵母细胞，因此适合制作固定化酵母的酵母菌培养液条件为转速230r/min，接种量为1．5mL,培养第8个小时。