限制酶 | BamHI | BclI | Sau3A I | HindIII |
识别序列及切割位点 | G1GATC C C CTAG1G | T1GATC A A CTAG1T | 1GATC CTAG1 | A1AGCT T T TCGA1A |
分析 分析图1:外源DNA上含有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII和Sau3A I的切割位点,其中限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII的识别序列都能被Sau3k I识别.
分析图2:质粒上有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII三种限制酶的识别序列和切割位点,其中BamHⅠ的切割位点位于两种抗生素抗性基因上.
解答 解:(1)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位.标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(以便筛选出含有目的基因的细胞).
(2)目的基因两侧有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII和Sau3A I的切割位点,若用限制酶BamHⅠ或Sau3A I切割会破坏质粒上两种抗性基因,因此用图中质粒和目的基因构建重组DNA时,应选用BclI和HindIII两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶作用后获得重组质粒.将目的基因导入微生物细胞时常有感受态细胞法,即先用Ca2+(或CaCl2)处理细胞,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞.
(3)基因表达载体的组成除了图中的启动子、标记基因(抗生素抗性基因)外,还有终止子和目的基因.
(4)由于选用BclI和HindIII两种限制酶构建基因表达载体时,破坏了氨苄青霉素抗性基因,但没有破坏四环素抗性基因,因此切割构建为了筛选出转入重组质粒的大肠杆菌,应在选择培养基中添加四环素.由于限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII的识别序列都能被Sau3k I识别,因此用Sau3k I切图质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段.
故答案为:
(1)RNA聚合酶 鉴别受体细胞中是否含有目的基因(以便筛选出含有目的基因的细胞)
(2)BclI和HindIII DNA连接酶 Ca2+(或CaCl2)
(3)终止子
(4)四环素 7
点评 本题结合基因结构图和运载体结构图,考查基因工程的技术和原理,重点是限制酶和DNA连接酶,要求考生认真分析图1和图2,能根据图中和表中信息选择合适的限制酶,准确判断使用DNA连接酶连接的结果,再运用所学的知识答题.
科目:高中生物 来源:2015-2016广东揭阳市高一下第一次月考生物试卷(解析版) 题型:选择题
下列叙述不正确的是( )
A.一条由n个氨基酸组成的肽链中含有的羧基数目和氧原子数目至少分别为1和n
B.通常情况下,分子式为C63H103O45N17S2的链式多肽化合物中最多含有16个肽键
C.n条由m个氨基酸组成的肽链中,完全水解共需要(m﹣n)个水分子
D.两个氨基酸脱水缩合过程中失去的水中的氢来源于氨基和羧基
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科目:高中生物 来源:2015-2016学年广东省东莞市高一(上)期末生物试卷(解析版) 题型:选择题
有关ATP的叙述,错误的是( )
A.线粒体合成的ATP可在细胞核中发挥作用
B.根细胞吸收矿质元素离子所需的ATP来源于呼吸作用
C.有氧与无氧的条件下细胞质基质中都能形成ATP
D.ATP中的两个高能磷酸键都易断裂、易形成
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
区域 | SS(%) | Ss(%) | ss(%) |
A | 80 | 18 | 2 |
B | 2 | 8 | 90 |
A. | A地S基因的频率为89%,B地S基因的频率为6% | |
B. | A、B两地的桦尺蠖因长期地理隔离已达到生殖隔离 | |
C. | A、B上两地的桦尺蠖基因型频率差异是自然选择的结果 | |
D. | A、B两地可能分别是煤炭工业区和远离城镇的山区 |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 人的遗传物质彻底水解后可得到6种小分子 | |
B. | ATP、磷脂、抗体、DNA的组成元素中都有C、H、O、N、P | |
C. | 蛋白质分子中的N主要存在于氨基中,核酸中的N主要存在于碱基中 | |
D. | 人体内参与信息传递的分子都是蛋白质 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 细胞是一切生物的基本单位 | B. | 动植物之间有一定的亲缘关系 | ||
C. | 细胞是动植物的基本单位 | D. | 动物和植物具有一定的统一性 |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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